细胞名称 杂交瘤细胞;1G10C11B12 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF Anti-Jun B 活化蛋白激酶B抗体 250克 Tryptic Soy Agar 胰胨大豆琼脂斜面 培养副溶血性弧菌,做细胞色素氧化酶实验 Anti-Jun D 活化蛋白激酶D抗体 250克 AP 碱性蛋白胨水 增殖霍乱弧菌及付霍乱弧菌 Anti-CK I alpha/STK 属丝/苏氨酸蛋白质激酶抗体 250克 Rose Bengal Agar 孟加拉红培养基 霉菌和酵母菌的总数测定 Anti-CK II Alpha/STK 属丝/苏氨酸蛋白质激酶抗体 250克 BiGGY Agar BiGGY琼脂 用于念珠菌的分离培养 Anti-CK II alpha/STK 属丝/苏氨酸蛋白质激酶抗体 250克 DRBC Agar 氯硝胺孟加拉红琼脂 食品中霉菌及酵母菌的分离培养 Anti-P-CK 广谱细胞角蛋白PCK抗体 250克 WORT Agar WORT琼脂 用于真菌,特别是酵母菌的计数和增菌培养 Anti-CK18 细胞角蛋白18抗体 250克 WORT Broth WORT肉汤 真菌和酵母菌的培养 Anti-CK18 细胞角蛋白18抗体(C端) 250克 Littman Agar Littman琼脂 真菌的分离培养 Anti-CK18 细胞角蛋白18抗体 250克 YM Broth YM肉汤 BR Anti-CK14/17/42/10 细胞角蛋白14抗体 250克 OGY Agar 土霉素葡萄糖酵母粉琼脂基础 霉菌、酵母菌分离培养和计数 Anti-CK15 细胞角蛋白15抗体 250克 WL Nutrient Agar 华伦斯坦实验室营养琼脂 啤酒和发酵产品中酵母菌和细菌的计数 Anti-CK16 细胞角蛋白16抗体 250克 Sabouraud BHI Agar 沙氏脑心浸液琼脂 真菌检测 Anti-CK17 细胞角蛋白17抗体 250克 Strain Medium(For B.Cerus) 菌种培养基 四环素检测中蜡样芽孢杆菌的培养 Anti-Phospho-Cytokeratin 17 (Ser44) 磷酸化细胞角蛋白17抗体 250克 Tetracyline Examination Agar 四环素检定琼脂 副溶血性弧菌的选择性分离培养 Anti-CK19 细胞角蛋白19抗体 250克 Dextrose Tryptone Agar 葡萄糖胰酪胨琼脂 嗜热菌芽孢(需氧芽孢总数、平酸芽孢和厌氧芽孢)分离培养 Anti-CK19 细胞角蛋白19抗体 250克 MYP agar base MYP琼脂基础 蜡样芽孢杆菌的固体平板计数 Anti-CK20 细胞角蛋白20抗体 250克 SPS Agar SPS琼脂 产气荚膜梭菌的平板计数 Anti-CK1/8/19 细胞角蛋白1/8/19抗体 250克 Chalmers Agar Modified 改良MC乳酸菌琼脂培养基 用于食品中乳酸菌总数的测定 Anti-CK2 细胞角蛋白2抗体 250克 MRSA MRS琼脂 用于食品中乳酸菌的培养 10mg 5-羟甲基糠醛 鉴别 111626-200804 0.2ml 沙棘油 鉴别 111627-200301 10mg 2”-O-没食子酰基金丝桃苷 含量测定 111629-200301 20mg 糠酸 鉴别 111630-200301 0.2ml α-亚麻酸 含量测定 111631-200502 20mg 射干苷 含量测定 111632-200501 0.2ml 正十八烷 含量测定 111636-200402 20mg 羟基红花黄色素A 含量测定 111637-200905 10mg 蜕皮甾酮 含量测定 111638-200402 20mg 马钱苷 含量测定 111640-201005 0.2ml 正己酸 鉴别 111641-200301 0.2ml 甲基丁香酚 含量测定 111642-200301 0.2ml 香叶醇 含量测定 111643-200301 20mg 鬼臼毒素 含量测定 111645-200301 50mg D-半乳糖醛酸 UV法含量测定 111646-200301 20mg 千金藤素 含量测定 111647-200301 20mg 异亮氨酸 鉴别 11649- 0.5ml 苯 含量测定 111650-200802 20mg 卡维丁 含量测定 111651-200301 20mg 氧化槐果碱 含量测定 111652-200301 20mg 白鲜碱 含量测定 111654-200301 20mg 5-羟色胺盐酸盐 含量测定 111656-200401 0.2ml 烈香杜鹃油 鉴别 111657-200301 0.2ml 月见草油 鉴别 111658-200301 杂交瘤细胞;1G10C11B1230mg 脯氨酸 鉴别 111659- 20mg 龙血素 A 含量测定 111660-200402 10mg 木栓酮 鉴别 111663-200401 20mg 表木栓醇 鉴别 111664-200401 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |