细胞名称 杂交瘤细胞;D6D 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF Anti-DAPK1 凋亡相关蛋白激酶1抗体 100毫升 Indian ink 印度墨水 炭疽杆菌检测用配套试剂 Anti-DAPK2 凋亡相关蛋白激酶2抗体 500克 Iodophor 附 炭疽杆菌检测用配套试剂 Anti-DAPK3 凋亡相关蛋白激酶3抗体 2毫升×10支 Campy-Cefex Supplement Campy-Cefex添加剂 添加于200ml CAMPY-CEFEX琼脂基础中 Anti-Deltex-1 DTX1抗体 10毫升×6支 多项目尿液化学分析控制品 多项目尿液化学分析控制品 Anti-envelope glycoprotein (Dengue virus type-2) 登革热病毒抗体 10毫升×8支 Cyanomethemoglobin reference solution 氰化高铁血红蛋白参比液(100g/L) Anti-polyprotein (DHAV) 鸭甲型肝炎A病毒抗体 10毫升×8支 Cyanomethemoglobin reference solution 氰化高铁血红蛋白参比液(150g/L) Anti-Desmin 结蛋白抗体 10毫升×8支 Cyanomethemoglobin reference solution 氰化高铁血红蛋白参比液(4种×2套) Anti-DIO2 脱酶2抗体 10毫升×3支 Ziehl-Neelsen Strain 萋-尼氏染色液 细菌耐酸染色液 Anti-DISC1 (CT) DISC1 C端抗体 9㎝/块 E.Coli Chromogenic Medium Dish 大肠杆菌显色培养基配套平皿 Anti-DISC1(NT) DISC1 N端抗体 250克 Anti-DLK1 穿膜蛋白DLK1抗体 9㎝/块 Coliform Chromogenic Medium Dish 大肠菌群显色培养基配套平皿 Anti-DLX4 DLX4抗体 1升 E.Coli&Coliform Chromogenic Medium 大肠杆菌&大肠菌群显色培养基 同时检测大肠菌群和大肠杆菌,培养24小时,大肠杆菌显紫色,大肠菌群显红色 Anti-DKK1 抑癌蛋白DKK1抗体 250克 Anti-DKK3 抑癌蛋白DKK3抗体 9㎝/块 E.Coli&Coliform Chromogenic Medium Dish 大肠杆菌&大肠菌群显色培养基配套平皿 Anti-DMT1 金属离子转运体1抗体 1升 Tryptone Bile X-glucuronide Agar TBX培养基 检测大肠菌群,大肠菌群培养24小时,显兰色 Anti-DMBT1 抑癌基因抗体 9㎝/块 Total Genes Chromogenic Medium Dish 细菌总数显色培养基配套平皿 Anti-Dnmt1 Dnmt1蛋白抗体 1升 O157 Chromogenic Medium 大肠杆菌O157显色培养基 用于大肠杆菌O157菌的显色培养 Anti-Dnmt3a DNA甲基转移酶-3α抗体 250克 Anti-Dnmt3 Beta DNA甲基转移酶-3β抗体 9㎝/块 O157 Chromogenic Medium Dish 大肠杆菌O157显色培养基配套平皿 约200mg 乙酰螺旋霉素 效价测定 130347-200403 200mg 核糖霉素 效价测定 130348-9301 200mg 磷霉素 效价测定 130350-200001 200mg 罗红霉素 效价测定 130351-200303 200mg 阿奇霉素 效价测定 130352-200706 150mg 西梭米星 效价测定 130353-200001 200mg 大观霉素 效价测定 130354-200001 200mg 奈替米星 效价测定 130355-200702 200mg 克拉霉素 效价测定 130356-200403 200mg 吉它霉素 效价测定及组分测定 130357-9901 100mg 交沙霉素 效价测定 130359-200301 100mg 万古霉素 效价测定 130360-200301 100mg 丙酸交沙霉素 效价测定 130361-200301 100mg 醋酸麦迪霉素 效价测定 130362-200301 200mg 依替米星 效价测定 130365-200702 200mg 巴龙霉素 效价测定 130371-200305 200mg 乙酰吉它霉素 效价测定 130372-200301 100mg 制霉菌素 效价测定 130375-200701 50mg 4-差向四环素 杂质检查 130401-200209 50mg 脱水四环素 杂质检查 130402-200203 50mg 脱水差向四环素 杂质检查 130403-200204 50mg 4-差向金霉素 杂质检查 130404-200209 50mg β-多西环素 杂质检查 130405-200405 150mg 头孢噻吩 含量测定 130407-200707 200mg 头孢氨苄 含量测定 130408-200710 100mg 阿莫西林 含量测定 130409-201011 100mg 氨苄西林 含量测定 130410-200706 100mg 新霉胺 杂质检查 130411-200307 50mg 头孢哌酮S异构体 系统适应性 130412-200902 100mg 醌式利福平 检查 130413-200303 50mg 3-甲基利福霉素 SV 检查 130414-8702 杂交瘤细胞;D6D50mg α-苯甘氨酸 杂质检查 130415-200904 50mg 7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸 杂质检查 130416-201006 100mg 无味氯霉素A晶型 检查 130417-8701 100mg 无味氯霉素B晶型 检查 130418-8701 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |