细胞名称 杂交瘤细胞;6B8 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C3 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF Anti-Phospho-DARPP32 (Thr75) 磷酸化多巴胺/cAMP调节磷蛋白抗体 50块 Nutrient Agar Plate 普通肉汤琼脂平板 一般细菌的培养和细菌总数的测定 Anti-DRD1 多巴胺受体D1抗体 10块 M-H Agar Plate M-H琼脂平板 Anti-DRD2 多巴胺受体D2抗体 10块 沙保弱氏琼脂平板 沙保弱氏琼脂平板 Anti-DRD3 多巴胺受体D3抗体 10支 KIA Plate 克氏铁琼脂斜面平板 Anti-DAT1 多巴胺转运蛋白抗体 10块 TCBS Agar Plate 弧菌选择琼脂平板 Anti-DRD4 多巴胺受体D4抗体 50块 Blood Agar Plate 血琼脂平板 营养需求较高的细菌培养 Anti-DRD5/Dopamine Receptor D5 多巴胺受体D5抗体 10块 SS Agar Plate SS琼脂平板 沙门菌属和志贺菌属细菌的分离培养 Anti-DBC1 膀胱癌缺失基因1 10块 EMB Agar Plate 伊红美兰琼脂平板 肠道革兰氏阴性菌的分离培养 Anti-Phospho-DBC1 (Thr454) 磷酸化膀胱癌缺失基因1 10块 China Blue Agar Plate 中国蓝琼脂平板 Anti-DBH 多巴胺β羟化酶抗体 10块 Sorbitol Maconkey Agar Plate 山梨醇麦康凯琼脂平板 Anti-DCC 结肠直肠癌缺失基因抗体 50块 MacC Agar Plate 麦康凯琼脂平板 大肠菌群及大肠杆菌分离 Anti-DCIR/CLEC4A C型凝集素结构域家族4成员A抗体 10块 Selectivity chocolate Plate 选择性巧克力平板 Anti-DCN/Decorin 核心蛋白聚糖抗体 10块 改良淋病奈瑟菌选择性琼脂平板 改良淋病奈瑟菌选择性琼脂平板 Anti-CLEC5A/MDL1 C型凝集素结构域家族5成员A抗体 10块 双洗琼脂平板 双洗琼脂平板 Anti-LAMP-3/DC-LAMP/CD208 CD208抗体 10毫升×2 V-P Reagent(A、B) V-P试剂盒(甲、抗酸性染乙液) 细菌V-P试验 Anti-DC-SIGN/CD209 细胞间粘附分子非整合素蛋白3抗体 50毫升×4 Gram Stain Solution(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ) 革兰氏染液(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)/Gram Stain Solution(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ) 细菌革兰氏染色 Anti-DC-SIGNR/CD299 CD299抗体 250毫升×4 Anti-DEC-205/CD205/Ly75 LY75抗体 500毫升×4 Anti-DCP 异常凝血酶原/脱-γ-羧基凝血酶原抗体 70毫升×3 结核冷染液 结核冷染液 Anti-Doublecortin 双皮质素抗体 10毫升 Fraser Supplement Fraser添加剂 添加到HB4193中,用于李氏菌的选择性增菌培养 2.0g 绵萆薢 TLC法鉴别 121545-200501 5.0g 黄根 TLC法鉴别 121546-200602 1.0g 藤合欢(南蛇藤果) TLC法鉴别 121547-200501 1.0g 川射干 TLC法鉴别 121548-200501 1.0g 合欢皮 TLC法鉴别 121549-200501 2.0g 草果 TLC法鉴别 121550-200501 1.0g 葛根(野葛) TLC法鉴别 121551-200902 1.0g 地锦草(斑地锦) TLC法鉴别 121552-200501 10g 黄精(制) TLC法鉴别 121553- 2.5g 苦杏仁(东北杏) TLC法鉴别 121554-200702 茵陈(茵陈蒿) TLC法鉴别 121555- 3.0g 橘叶 TLC法鉴别 121556-200701 2.0g 老鹳草 TLC法鉴别 121557-200801 0.5g 陈皮炭 TLC法鉴别 121558-200801 1.0g 粘委陵菜 TLC法鉴别 121559-200801 1.0g 桃仁(山桃) TLC法鉴别 121560-200601 1.0g 香橼(枸橼) TLC法鉴别 121561-200801 土垄大白蚁巢 TLC法鉴别 121563- 8.0g 战骨 TLC法鉴别 121564-200601 1.0g 蚂蚁(棕褐林蚁) TLC法鉴别 121565-200601 2.0g 豨莶草(豨莶) TLC法鉴别 121572-200601 1.0g 五倍子(青麸杨) TLC法鉴别 121573-200701 5.0g 芸香草 TCL法鉴别 121574-201001 3.0g 汉桃叶 TCL法鉴别 121575-200901 10.0g 石见穿 TCL法鉴别 121579-201001 杂交瘤细胞;6B81.0g 印度樟牙菜 鉴别 121581-200701 2.0g 裸花紫珠 TCL法鉴别 121582-201001 2.0g 羊耳菊 TCL法鉴别 121583-200901 1ml ▲甲醇 供残留溶剂检查用 130100-2 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |