细胞名称 杂交瘤细胞;ETMcAb3A7 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 半贴壁生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C3 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF Anti-Phospho-Cyclin B1 (Ser147) 磷酸化周期素B1抗体 100克 Phenylalanine Deaminase Medium 苯丙氨酸琼脂培养基 用于细菌苯丙氨酸脱羧酶试验 Anti-Phospho-Cyclin B1 (Ser133) 磷酸化周期素B1抗体 250克 Pseudomonas Agar P 假单胞P琼脂 铜绿(绿脓)假单胞菌色素生成试验 Anti-Cyclin C 周期素C抗体 250克 Pseudomonas Agar F 假单胞F琼脂 铜绿(绿脓)假单胞菌色素生成试验 Anti-Cyclin D1 周期素D1抗体 10克 Dulcitol Semisolid Agar 卫矛醇半固体琼脂 细菌卫矛醇发酵试验 Anti-Phospho-Cyclin D1 (Thr286) 磷酸化cyclin D1抗体 250克 NO.4 Agar Base 四号琼脂 霍乱弧菌选择性分离培养 Anti-Cyclin D2 周期素D2抗体 250克 Wagstsuma Agar Base 我妻氏血琼脂培养基基础 用于副溶血性弧菌的溶血试验 Anti-Cyclin D3 周期素D3抗体 250克 L Nac1 Peptone Water 60%/L氯化钠蛋白胨肉汤 副溶血性弧菌的前增菌培养 Anti-Cyclin E 周期素E抗体 250克 42℃ Growth Medium 42℃生长培养基 副溶血弧菌42℃生长试验 Anti-phospho-Cyclin E(Thr395) 磷酸化周期素E抗体 250克 Casein Agar Medium 水解酪蛋白琼脂 用于鉴别蜡样芽孢杆菌分解酪蛋白试验 Anti-phospho-Cyclin E(Thr62) 磷酸化周期素E抗体 250克 Ammonium Dextrose Medium 葡萄糖铵培养基 志贺氏菌的葡萄糖铵试验 Anti-Cyclin F 周期素F抗体 250克 Dextrose Semisolid Medium 葡萄糖半固体发酵管 用于志贺氏菌的生化试验 Anti-Cyclin G 周期素G抗体 250克 Kilgler Iron Agar 克氏双糖铁琼脂 细菌复合生化试验 Anti-Cyclin H 周期素H抗体 250克 Phosphate Glucose Peptone Water 磷酸盐葡萄糖蛋白胨水培养基 用于甲基红试验 Anti-Cystatin 3/CST3 胱抑素C/半胱氨酸蛋白酶抑制剂C抗体 100克 Korser Citrate Sodium Broth KORSER氏柠檬酸盐肉汤 用于细菌的枸橼酸盐试验 Anti-Cytoglobin 细胞球蛋白抗体 250克 VRBA 结晶紫中性红胆盐琼脂 用于大肠菌群的检验 Anti-CYLD 微管结合蛋白CYLD抗体 250克 Salmonella Arizona Agar SA琼脂 亚利桑那沙门氏菌的选择性分离 Anti-phospho-CYLD(Ser418) 磷酸化微管结合蛋白CYLD抗体 250克 Azide Dextrose Broth 叠氮钠葡萄糖肉汤 链球菌、肠球菌、粪链球菌的增菌培养 Anti-CYP1A1 细胞色素P450 1A1抗体 100克 KF Streptococcus Agar KF链球菌琼脂 链球菌的选择性分离和计数 Anti-P450 1A2/CYP1A2 细胞色素P450 1A2抗体 250克 EVA Broth EVA肉汤 用于链球菌的增菌培养 Anti-CYP11A1/P450SCC 细胞色素P450 11A1抗体 250克 LIM Medium 赖氨酸吲哚动力培养基 用于链球菌的分离培养;细菌的赖氨酸、吲哚和动力复合生化试验 Anti-CYP2C9 细胞色素P450 2C9抗体 250克 BETA-SSA Agar BETA-SSA琼脂 链球菌的选择性分离培养 Anti-CYP3A4 细胞色素P450 3A4抗体 250克 Trypticase Soy Sheep Blood Agar Base 胰酪胨大豆羊血琼脂基础 蜡样芽孢杆菌的溶血测试验 Anti-CYP2D6 细胞色素P450 2D6抗体 250克 V-P Medium Modified 改良V-P培养基 蜡样芽孢杆菌的溶血试验 Anti-CYP19 细胞色素P450 19抗体 250克 R-2A Agar R2A琼脂 饮用水中导生细菌分离培养 20mg 野百合碱 *内标用 111878-201001 20mg 洋艾素 供含量测定用 111879-201001 20mg α-常春藤皂苷 供含量测定用 111880-201001 20mg 格列风内酯 供鉴别 111883-201001 20mg 款冬酮 供含量测定用 111884-201001 20mg 蟛蜞菊内脂 供含量测定用 111885-201001 20mg 旱莲苷A 薄层色谱 111886-201001 20mg 太子参环肽B 供含量测定用 111887-201001 20mg 对羟基苯乙酮 供含量测定 111897-201001 20mg 芫花素(暂行) 供含量测定 111899-201001 20mg 橙黄决明素(暂行) 供含量测定用 111900-201001 20mg 芹菜素 供含量测定用 111901-201001 20mg 人参皂苷Ro 供鉴别用 111903-201001 20mg 山麦冬皂苷B 供鉴别用 111907-201001 20mg 短亭山麦冬皂苷C 供鉴别用 111908-201001 杂交瘤细胞;ETMcAb3A7鲁斯可皂苷 111909-201001 20mg 木通苯乙醇苷B (荷苞花苷) 含量测定 111910-201001 10mg 通关藤苷H 供含量 111913-201001 2.5g 千斤拔 TLC法鉴别 121502-200501 2g 三白草 TLC法鉴别 121503-200501 0.5g 山柰 TLC法鉴别 121504-200401 2g 仙茅 TLC法鉴别 121505-200702 0.5g 贯叶金丝桃 TLC法鉴别 121506-200501 1g 芒果叶 TLC法鉴别 121507-200501 2.0g 玫瑰花 TLC法鉴别 121508-200702 0.5g 密蒙花 TLC法鉴别 121509-200501 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |