细胞名称 小鼠杂交瘤细胞株;WV-TT-05 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 悬浮生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF Anti-EphA2/Eph receptor A2 内皮细胞受体蛋白酪氨酸激酶抗体 20支 水杨苷发酵管 水杨苷发酵管 BR Anti-Phospho-EphA2 (Tyr594) 磷酸化酪氨酸蛋白激酶A2受体抗体 20支 OF发酵管 OF发酵管 BR Anti-EphA4 R 酪氨酸蛋白激酶A4受体抗体 20支 ONPG发酵管 ONPG发酵管 BR Anti-EphB2 R EphB2 R抗体 5毫升 肝素抗凝管 肝素抗凝管 Anti-EPOR 红细胞生成素受体抗体 10毫升 Anti-EphB6 酪氨酸蛋白激酶受体B6抗体 250克 Rambach琼脂 Rambach琼脂 金黄色葡萄球菌快速显色分离培养 Anti-ER-alpha 雌激素受体α抗体 250克 耶尔森氏菌显色培养基 耶尔森氏菌显色培养基 耶尔森氏菌快速显色分离培养 Anti-ERAB 内质网Aβ相关结合蛋白抗体 250克 乳酸菌检测计数显色培养基 乳酸菌检测计数显色培养基 乳酸菌快速显色分离培养 Anti-ERCC1 DNA切除修复蛋白1抗体 250克 蜡样芽孢杆菌计数显色培养基 蜡样芽孢杆菌计数显色培养基 蜡样芽孢杆菌快速显色分离培养 Anti-ERK2/MAPK1 丝裂原活化蛋白激酶1抗体 250克 克雷伯氏显色培养基 克雷伯氏显色培养基 克雷伯氏菌快速显色分离培养 Anti-phospho-MEK1/MAPKK1(Ser298) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶1抗体 1万毫升/袋 马丁肉汤 马丁肉汤 猪肺疫、牛肺疫、兔出败等疫苗及检验用 Anti-phospho-MEK1 (Thr286) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶1抗体 1万毫升/袋 肉肝胃消化干粉培养基 肉肝胃消化干粉培养基 猪丹毒、牛副伤寒疫苗 Anti-Phospho-MEK1/2 (Ser217/221) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶1/2抗体 1万毫升/袋 链球菌培养基 链球菌培养基 链球菌疫苗及检验用 Anti-Phospho-MEK1/2 (Ser221) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶1/2抗体 1万毫升/袋 仔副菌培养基 仔副菌培养基 仔猪副伤寒疫苗制备 Anti-phospho-ERK1/MAPK-1/2(Thr183/185) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体 1万毫升/袋 酵母蛋白胨培养基 酵母蛋白胨培养基 制备猪巴氏杆菌灭活疫苗 Anti-phospho-ERK1(Thr202/Tyr204) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1抗体 1万毫升/袋 胰酶牛肉汤 胰酶牛肉汤 快疫疫苗用 Anti-ERK1/2(p44/42 MAPK) 丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体 1万毫升/袋 鸡鼻炎合成培养基 鸡鼻炎合成培养基 鸡鼻炎灭活苗制备用 Anti-phospho-p44/42 MAPK (Thr202/Tyr204) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体 250克 Twofold Lactose Bile Salt Broth 双料乳糖胆盐培养基 用于化妆品中粪大肠菌群的测定 Anti-phospho-ERK1(Thr202/Thr204)+ERK2(Thr183/Tyr185) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体 250克 Lactose Medium 液体乳糖培养基 用于食品中沙门氏菌检验前增菌培养 Anti-phospho-ERK1(Thr197/Thr202) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体 250克 Acetamide Agar 乙酰胺酚红琼脂 测定绿脓杆菌色素分离、培养 50mg 双硫化物 检查用 常温,避光 100587-200901 100mg 匹多莫德 含量测定 常温,避光 100588-200501 100mg 醋甲唑胺 含量测定 常温,避光 100589-200501 100mg 阿托伐他汀钙 含量测定 常温,避光 100590-200902 100mg 己酮可可碱 含量测定 常温,避光 100591-200501 50mg 氯波必利 含量测定 常温,避光 100592-200401 50mg 异丁司特 含量测定 常温,避光 100593-200401 100mg 醋氨己酸锌 供检查用 常温,避光 100594-200801 100mg 异环磷酰胺 含量测定 常温,避光 100595-200501 100mg 二丙酸倍他米松 含量测定 常温,避光 100596-200601 100mg 氯沙坦钾 含量测定 常温,避光 100597-200501 100mg 氟他胺 含量测定 常温,避光 100598-200601 100mg 盐酸氨溴索 含量测定 常温,避光 100599-200502 100mg 辛伐他汀 HPLC法含量测定 2-8℃,避光 100601-201003 50mg 厄多司坦 含量测定 常温,避光 100602-200301 100mg 琥珀酸舒马普坦 UV法含量测定 常温,避光 100603-200401 100mg 盐酸氮桌斯汀 含量测定 常温,避光 100604-200701 100mg 托拉塞米 HPLC法含量测定 常温,避光 100605-200401 50mg 萘哌地尔 含量测定 常温,避光 100606-200301 50mg 厄贝沙坦 含量测定 常温,避光 100607-200301 100mg 奥硝唑 含量测定 常温,避光 100608-200301 100mg 马来酸替加色罗 UV法含量测定 常温,避光 100609-200401 小鼠杂交瘤细胞株;WV-TT-0550mg 三苯双脒 UV法含量测定 常温,避光 100610-200401 50mg 非那雄胺 含量测定 常温,避光 100611-200301 100mg 利塞膦酸钠 含量测定 常温,避光 100613-200401 50mg 盐酸法舒地尔 UV法含量测定 常温,避光 100614-200401 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |