细胞名称 小鼠杂交瘤细胞株；GPC3-1H5 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 悬浮生长 特征特性 该细胞属保藏，其特征特性尚未公开。 培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS 传代方法 1:3传代，3-4天传1次 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF Anti-Dynamin 2 酶动力蛋白2抗体 10升 高糖,含L-谷氨酰胺，粉末 Anti-Nadrin Dysbindin抗体 500毫升 高糖,含L-谷氨酰胺，液体 Anti-Dysferlin Dysferlin蛋白抗体 10升 低糖，粉末 Anti-E2F1 转录因子E2F-1抗体 500毫升 低糖，液体 Anti-E2F2 转录因子E2F-2抗体 250克 M9 Broth M9肉汤 BR Anti-E2F3 转录因子E2F-3抗体 250克 M9CA Broth M9CA肉汤 BR Anti-E2F4 转录因子E2F-4抗体 250克 M63 Broth M63肉汤 BR Anti-E2F5 转录因子E2F-5抗体 10升 F-12 Nutrient Mixture F-12营养混合物 含L-谷氨酰胺，不含NaHCO3 Anti-E2F6 转录因子E2F6抗体 500毫升 不含谷氨酰胺 Anti-E2 tag E2 tag标签抗体 500毫升 含谷氨酰胺 Anti-HPV16 E7 protein 人瘤病毒16型E7抗体 10升 F-12（DMEM） DMEM/F12培养基 BR Anti-EAAT1/Glast 胶质细胞谷氨酸运载蛋白1抗体 10升 M199 Medium M199培养基 细胞培养用 Anti-EAAT2 胶质细胞谷氨酸运载蛋白2抗体 10升 RPMI 1640 1640培养基 含L-谷氨酰胺，不含碳酸氢钠 Anti-EAAT3 胶质细胞谷氨酸运载蛋白3抗体 10升 无酚红，含L-谷氨酰胺 Anti-EBNA 3A EB病毒核抗原-3A抗体 500毫升 无血清，含双抗 Anti-ECE1 内皮素转化酶1抗体 500毫升 Hanks’ Balanced Salt solution Hanks’平衡盐 细胞培养级 100mg 甲氧沙 含量测定 常温，避光 100437-200601 100mg 对氨基水杨酸异UV法溶出度检查 常温，避光 100438-200401 100mg 帕司烟肼 UV法溶出度检查 常温，避光 100438-200401 50mg 曲匹布通 含量测定 常温，避光 100439-200301 50mg 曲匹地尔 TCL法检查 常温，避光 100440-200301 50mg 桂美酸 溶出度检查 常温，避光 100441-200401 100mg 奥拉米特 UV法溶出度检查 常温，避光 100442-200301 100mg 富马酸异丙吡仑 HPLC法含量测定 常温，避光 100443-200701 100mg 对羟基苯甲酸丙酯 检查用 常温，避光 100444-200401 100mg 贝美格 含量测定 常温，避光 100446-200501 100mg 丹皮酚磺酸钠 含量测定 常温，避光 100447-200701 100mg 地喹氯铵 HPLC法含量测定 常温，避光 100448-200801 100mg 苯佐卡因 含量测定 常温，避光 100454-200501 100mg 度米芬 HPLC法含量测定 常温，避光 100455-200401 50mg 盐酸丁卡因 HPLC法含量测定 常温，避光 100456-200301 100mg 盐酸硫必利 UV法含量测定 常温，避光 100459-200401 100mg 新鱼醒草素钠 含量测定 常温，避光 50mg 甲基斑蝥胺 HPLC法含量测定 常温，避光 100465-200401 100mg 呋喃唑酮 含量测定 常温，避光 100466-200401 100mg 吗多明 含量测定 常温，避光 100467-200701 50mg 替加氟 HPLC法含量测定 常温，避光 100468-200401 50mg 尿嘧啶 HPLC法含量测定 常温，避光 100469-200401 小鼠杂交瘤细胞株；GPC3-1H5200mg 柠檬烯 含量测定 常温，避光 100470-200701 50mg 溴丙胺太林 HPLC法含量测定 常温，避光 100471-200301 50mg 盐酸妥洛特罗 HPLC法含量测定 常温，避光 100472-200401 50mg 盐酸环仑特罗 UV法含量测定 常温，避光 100473-200401 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
