细胞名称 小鼠杂交瘤细胞株;Sm-IgM 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 悬浮生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 光素标记磷酸化丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗体IgG Anti-Phospho-MARCKS (Ser162) /FITC 荧光素标记磷酸化丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗体IgG Anti-MAPKK1 /FITC 荧光素标记丝裂原活化蛋白激酶激酶1抗体IgG Anti-MAPKK2 /FITC 荧光素标记丝裂原活化蛋白激酶激酶2抗体IgG Anti-SEK1/MKK4/FITC 荧光素标记丝裂原活化蛋白激酶激酶4抗体IgG Anti-Phospho-SEK1/MKK4 (Ser80)/FITC 荧光素标记磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶4抗体IgG Anti-Phospho-SEK1/MKK4 (Ser257) /FITC 荧光素标记磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶4抗体IgG Anti-Phospho-SEK1/MKK4 (Ser257/Thr261)/FITC 荧光素标记磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶4抗体IgG Anti-p44/42 MAPK (phospho Thr202/Tyr204) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体IgG Anti-MKK7/FITC 荧光素标记丝裂原活化蛋白激酶激酶7抗体IgG Anti-MKK7/FITC 荧光素标记丝裂原活化蛋白激酶MKK7IgG Anti-MARCO/FITC 荧光素标记巨噬细胞清道夫受体抗体IgG Anti-MASP/FITC 荧光素标记抗MBL相关丝氨酸蛋白酶抗体IgG Anti-MASP2/FITC 荧光素标记甘露聚糖结合凝集素丝氨酸肽酶2抗体IgG Anti-Matriptase/FITC 荧光素标记兔抗蛋白裂解酶抗体IgG Anti-MATH1/FITC 荧光素标记肠道分化干细胞MATH-1蛋白抗体IgG Anti-Matrilin 1/CMP/FITC 荧光素标记软骨基质蛋白抗体IgG Anti-MBP/FITC 荧光素标记髓鞘碱性蛋白抗体IgG Anti-MBP/HRP 辣根过氧化物酶标记髓鞘碱性蛋白抗体IgG Anti-Mcl-1/FITC 荧光素标记髓样细胞白血病-1抗体IgG Anti-Phospho-Mcl1 (Ser159/Thr163)/FITC 荧光素标记磷酸化髓样细胞白血病-1抗体IgG Anti-MCM2/FITC 荧光素标记微小染色体维持缺陷蛋白2抗体IgG Anti-MCM3/FITC 荧光素标记微小染色体维持缺陷蛋白3抗体IgG Anti-MCM5/CDC46/FITC 荧光素标记微小染色体维持缺陷蛋白5抗体IgG Anti-MCM7/FITC 荧光素标记微小染色体维持缺陷蛋白7抗体IgG Anti-MCP-1/FITC 荧光素标记巨噬细 99701 1000mg 邻位甲酚 GC法含量测定 常温,避光 100196-200803 50mg 硫唑嘌呤 检查用 常温,避光 100197-201002 100mg 萘普生 UV法含量测定 常温,避光 100198-201004 100mg 泼尼松 含量测定 常温,避光 100199-201002 50mg 青蒿琥酯 含量测定 常温,避光 100200-200202 100mg 右美沙芬 含量测定 常温,避光 100201--201003 100mg UV法含量测定 常温,避光 100203-200503 100mg 沙丁胺醇 含量测定 常温,避光 100204-200702 100mg 双香豆素 含量测定 常温,避光 100205-200701 50mg 双氰胺 TLC法检查用 常温,避光 100206-200302 50m 水杨酸镁 含量测定 常温,避光 100208-200102 100mg 司坦唑醇 含量测定 常温,避光 100209-201003 50mg 苯妥英钠 含量测定 常温,避光 100210-201002 50mg 辛可尼丁 检查用 常温,避光 100211-200502 50mg 溴甲贝那替嗪 检查用 常温,避光 100212-199701 100mg 乙羟茶碱 检查用 常温,避光 100215-200601 100mg 盐酸安他唑啉 含量测定 常温,避光 100216-200702 50mg 盐酸美西律 含量测定 常温,避光 100218-199601 50mg 盐酸酚苄明 含量测定 常温,避光 100219-199902 50mg 盐酸罗通定 鉴别 常温,避光 100222-200702 50mg 盐酸维拉帕米 含量测定 常温,避光 100223-200102 100mg 异维A酸 含量测定 2-8℃,避光 100224-200903 100mg 贝诺酯 含量测定 常温,避光 100225-200502 50mg 半乳糖 含量测定 常温,避光 100226-200404 30mg 醋酸去氧皮质酮 供UV法含量测定 常温,避光 100227-201001 50mg 醋酸甲萘氢醌 含量测定 常温,避光 100228-199802 100mg 富马酸氯马斯汀 HPLC法含量测定 常温,避光 100229-200803 100mg 富马酸酮替芬 含量测定 常温,避光 100230-200602 小鼠杂交瘤细胞株;Sm-IgM50mg 环吡酮胺 含量测定 常温,避光 100232-200201 100mg 环己胺 检查用 常温,避光 100233-200301 100mg 环磷酰胺 含量测定 常温,避光 100234-200502 50mg 己内酰胺 检查用 常温,避光 100235-199701 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |