细胞名称 杂交瘤细胞株;12G6 形态特性 淋巴母细胞样 生长特性 悬浮生长 特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。 培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS 传代方法 1:3传代,3-4天传1次 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 记磷酸化Ras特异性鸟嘌呤核苷酸释放因子1抗体IgG Anti-Rb/P105 RB/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠成视网膜细胞瘤抑癌蛋白抗体IgG Anti-RCC1/FITC 荧光素标记染色体浓缩调控蛋白1抗体IgG Anti-Rbms3 protein/FITC 荧光素标记Rbms3 protein抗体IgG Anti-Phospho-RCC1 (Ser11) /FITC 荧光素标记磷酸化染色体浓缩调控蛋白1抗体IgG Anti-Reprimo/Rprm/FITC 荧光素标记细胞质内的糖基化蛋白抗体IgG Anti-Resistin/FITC 荧光素标记抵抗素抗体IgG Anti-RelB /FITC 荧光素标记核转录因子NFKB-RelB蛋白抗体IgG Anti-Regucalcin/SMP30/Rgn/FITC 荧光素标记衰老标记蛋白30抗体IgG Anti-RICTOR/FITC 荧光素标记雷帕霉素靶蛋白复合体2抗体IgG Anti-Phospho-Rictor (Thr1135)/FITC 荧光素标记磷酸化雷帕霉素靶蛋白复合体2抗体IgG Anti-Phospho-RelB (Ser552)/FITC 荧光素标记磷酸化核转录因子NFKB-RelB蛋白抗体IgG Anti-RELMa/FITC 荧光素标记抵抗素样分子α抗体IgG Anti-RELN(Reelin)/FITC 荧光素标记络丝蛋白抗体IgG Anti-TGF- Beta1/RBITC 红色荧光素罗丹明标记TGF-β1蛋白抗体IgG Anti-RGS2/FITC 荧光素标记G蛋白信号转导调节因子2抗体IgG Anti-RGS5 /FITC 荧光素标记兔抗人G蛋白信号转导调节因子5抗体IgG Anti-RRM1/FITC 荧光素标记抗核糖核苷酸还原酶1抗体IgG Anti-RhoA /FITC 荧光素标记RhoA抗体IgG 量测定用 50mg 171251-200401 盐酸二氢埃对照品 UV法含量测定用 20mg 171252-200401 酒石酸双氢可待因 对照品 HPLC法含量测定用 50mg 171253-200401 劳拉西泮 对照品 HPLC法含量测定 100mg 171254-200401 2-氨基-2’,5-二氯二苯甲酮(劳拉西泮杂质B) 对照品 TLC法有关物质检查 100mg 171256-200401 盐酸吗啡 对照品 鉴别 100mg 银杏酸 对照品 含量测定 20mg 32619-42-4 橄榄苦苷 橄榄苦甙 Oleuropein HPLC≥98% 136085-37-5 党参炔苷 党参炔甙 Lobetyolin HPLC≥98% 639426 鼠尾草酸 Carnosic?acid HPLC≥98% 20283-92-5 迷迭香酸 Rosmarinic acid HPLC≥98% 40246-10-4 黄豆黄苷 黄豆黄甙 Glycitin HPLC≥98% 40957-83-3 黄豆黄素 Glycitein HPLC≥98% 552-66-9 大豆苷 大豆甙 Daidzin HPLC≥98% 486-66-8 大豆苷元 大豆甙元;黄豆苷元 Daidzein HPLC≥98% 446-72-0 染料木素 染料木黄酮;金雀异黄酮 Genistein HPLC≥98% 529-59-9 染料木苷 5,7-三羟异黄酮-7-糖苷 Genistin HPLC≥98% 482-44-0 欧前胡素 Imperatorin HPLC≥98% 482-45-1 异欧前胡素 Isoimperatorin HPLC≥98% 杂交瘤细胞株;12G622338-71-2 远志酸 Polygalacic acid HPLC≥98% 2469-34-3 远志皂苷元 Senegenin HPLC≥98% 58543-16-1 莱苞迪甙A 莱苞迪苷A Rebaudioside A HPLC≥98% 21967-41-9 黄芩苷 黄芩甙 Baicalin 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |