细胞名称 大鼠雪旺细胞;RSC96 形态特性 神经元 生长特性 贴壁生长 特征特性 RSC96细胞株是原代培养的大鼠雪旺细胞经长时间培养后自发转化而成的[PubMed: 9766530]。 2002年十二月提交到ATCC的培养物污染了支原体。 其后代通过BM 细胞周期蛋白处理21天消除支原体。 处理后六周,用Hoechst染色、PCR和标准培养测试进行支原体检测。 结果都呈阴性。 培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 优质胎牛血清,10% 传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。 传代情况 PN5 冻存条件 *培养基+8%DMSO 支原体检测 阴性 STR 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF >95% (α+β) -岚香酮酸 Elemolic acid (α+β) >95% β-岚香酮酸 Elemonic acid (β) >95% 4-烯丙基苯甲醚 Estragole >95% 醋酸香叶酯 Geranyl acetate >95% 甘草酸单铵 Glycyrrhizin ammonical hydrate >90% 去甲骆驼蓬碱 Harmalol >95% N-(2-甲基丙基)-4,5-癸二烯酰胺 ISOBUTYLDECADIENAMIDE, N-(2E,4E)- >95% 异丁子香酚 Isoeugenol >95% 异丁香酚 Isoeugenol >95% (-)-假马齿苋皂苷C Jujubogenin isomer of bacopasaponin C >95% 对甲氧基肉桂酸乙酯 PARAMETHOXYETHYLCINNAMATE >95% 二水槲皮素 Quercetin dihydrate >95% 3,3',4',5,7-五羟基黄酮二水合物 Quercetin dihydrate >95% 4,8,12-*基-1-异丙基-3,7,11-环十四三烯-1-醇 Serratol >95% 蒲公英赛醇 Taraxerol >95% 反式-2,4,5-*氧基-1-丙烯苯 α-asarone >95% BETA-细辛脑 β-asarone >95% Beta-乳香酸 β-boswellic acid >95% Beta-葡糖倍苷 β-Glucogallin >95% beta-谷甾醇 β-sitosterol >95% 植物甾醇 β-sitosterol >95% 花青素3-阿拉伯糖苷 Cyanidin 3-arabinoside chloride 矢车菊素半乳糖苷 Cyanidin 3-galactoside chloride >97% 氯化花青素-3-槐糖苷 Cyanidin 3-O-sophoroside chloride >98% 花青素鼠李葡糖苷 Cyanidin 3-rutinoside chloride >98% 矢车菊素-3-桑布双糖苷 Cyanidin 3-sam Anti-MYSM1 MYSM1抗体 Anti-MYOZ/MYOZ1 MYOZ抗体 Anti-MyoD1/Myf3 肌原调节蛋白抗体 Anti-SM Myosin (Smooth Muscle) 人心肌肌凝蛋白(平滑肌) 小鼠单抗 Anti-CHRNA4 烟碱型乙酰胆碱受体α4抗体 Anti-CHRNA7 烟碱型乙酰胆碱受体α7抗体 Anti-CHRNA2(neuronal) 烟碱型乙酰胆碱受体A2(神经型)抗体 Anti-/NADPH oxidase 1 有丝分裂氧化酶1抗体 Anti-Nox3/NADPH oxidase 3 有丝分裂氧化酶2抗体 Anti-NOX4/NADPH oxidase 4 NADPH氧化酶NOX家族的成员4抗体 Anti-Nanog 胚胎干细胞关键蛋白抗体 Anti-NAIF1 protein 核凋亡诱导因子蛋白1 Anti-Natrexone 抗纳曲酮抗体IgG Anti-NAP1/NAP1L1 核小体组装蛋白1抗体 Anti-NB3/CNTN6 神经细胞NB3特定蛋白抗体 Anti-P95/NBS1 DNA修复蛋白NBS1抗体 Anti-Phospho-p95/NBS1 (Ser343) 磷酸化DNA修复蛋白NBS1抗体 Anti-N-cadherin N-钙粘附分子抗体 Anti-E-cadherin 上皮钙粘附分子抗体 Anti-Nck1/Nck2 NCK衔接因子蛋白2抗体 Anti-NCOA2/KAT13C 核受体辅助激活蛋白2抗体 Anti-NCoR1 核受体辅助抑制因子1抗体 大鼠雪旺细胞;RSC96Anti-NEDD4L/NEDD4-2 泛素连接酶NEDD4-2抗体 Anti-Phospho-NEDD4L (Ser342) 磷酸化泛素连接酶NEDD4-2抗体 Anti-NCoR2 核受体辅助抑制因子2抗体 Anti-NEP/MME 金属肽链内切酶抗体 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |