细胞名称 大鼠胰岛细胞瘤细胞;INS-1 形态特性 不规则,多角 生长特性 贴壁生长 特征特性 该细胞源自X射线照射的移植胰岛瘤的大鼠,胰岛素阳性,可合成胰岛素原I和II,可用于beta细胞功能研究。 培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;50 μmol/L 2- 传代方法 传代情况 C9 冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS 支原体检测 培养法(-) STR - 同工酶 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF G ≥98% 拟人参皂苷F1l Pseudoginsenoside F11 ≥98% 鸟苷 GUANOSINE ≥95% 蟛蜞菊内酯 Wedelolactone ≥97% 平贝碱甲 Pingbeimine A 98% 七叶皂苷A(IA) Escin IA;Aescin IA ≥97% 七叶皂苷B(IB) Escin IB;Aescin IB ≥95% 七叶皂苷C Escin IIA;Aescin IIA ≥95% 七叶皂苷D Escin IIB;AescinIIB ≥92% 千层纸素A Oroxylia A 95% 氢溴东莨菪碱 Scopolamine Hydrobromide 97% 去氢荷包牡丹碱 Dehydrodicentrine 95% 去氧穿心莲内酯 Deoxyandrographolide??? ≥95% 穿心莲甲素 Deoxyandrographolide??? ≥95% 脱羟基穿心莲内酯 Deoxyandrographolide??? ≥95% 14-去氧穿心莲内酯 Deoxyandrographolide??? ≥95% 人参苷元F11 Aglycone - F11 ≥97% 瑟丹酸内酯 Sedanolide ≥97% 山茱萸新苷 Cornuside 90% 山茱萸裂苷 Cornuside 90% 商陆皂苷乙 Esculentoside B 95% 98% 升麻酮醇-3-O-α-L-拉伯糖苷 Cimigenol-3- O-α-L -arabinoside ≥99% 矢车菊素3-O-葡萄糖苷 Cyanidin 3-O-glucoside ≥95% 双脒苯脲 Imidocarb 95% 双氢环孢菌素A Dihydrocyclosporin A ≥95% 双氢环孢菌素C Dihydrocyclosporin C ≥95% 双氢环孢菌素H Dihydrocyclospor Anti-Torc2/Crtc2 CREB转录共激活因子TORC2抗体 Anti-Phospho-Torc2/Crtc2 (Ser171) 磷酸化CREB转录共激活因子TORC2抗体 Anti-Morphine 吗啡单克隆抗体 Anti-Amphetamine 单克隆抗体(安) Anti-MEK1/2(MAPKK1) 丝裂原活化蛋白激酶激酶1抗体 Anti-MEK2/MAPKK2 丝裂原活化蛋白激酶激酶2抗体 Anti-MAPKAP Kinase 2 丝裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗体 Anti-Phospho-MAPKAPK2 (Thr222) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗体 Anti-Phospho-MAPKAPK2 (Thr334) 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗体 Anti-Matrilin 1 软骨基质蛋白抗体 Anti-ASK1 细胞凋亡信号调节激酶1抗体 Anti-phospho-ASK1(Ser966) 磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体 Anti-phospho-ASK1(Ser967) 磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体 Anti-phospho-ASK1(Thr845) 磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体 Anti-Maspin 抑癌基因抗体 Anti-MASP 甘露聚糖结合凝集素丝氨酸肽酶1抗体 Anti-MASP2 甘露聚糖结合凝集素丝氨酸肽酶2抗体 Anti-Matriptase 蛋白裂解酶(一种新的癌基因)抗体 Anti-MBP 髓鞘碱性蛋白抗体 Anti-CMV/HCMV PP65/HHV5 PP65 巨细胞病毒PP65/CMV低基质磷脂蛋白抗体 Anti-HCMV 人巨细胞病毒 大鼠胰岛细胞瘤细胞;INS-1Anti-HCMV UL23 人巨细胞病毒UL23抗体 Anti-HCMV UL49 人巨细胞病毒UL49蛋白抗体 Anti-MCP-1/CCL2 单核细胞趋化蛋白1抗体(大、小鼠) Anti-MCP-1/CCL2 单核细胞趋化蛋白1抗体(人) 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |