细胞名称 Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256 形态特性 实体瘤 生长特性 体内生长 特征特性 常用的大鼠来源瘤株,用于建立大鼠肿瘤移植模型。 培养条件 - 传代方法 制备成细胞悬液接种至Wistar大鼠。 传代情况 不详 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 培养法(-) STR - 同工酶 染色体 - 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 穿心莲内酯 Andrographolide ≥98% 穿心莲乙素 Andrographolide ≥98% 刺五加苷D Eleutheroside D ≥98.0% 德尔塔林 deltaline ≥97% 丁香醛 3,5-Dimethoxy-4-hydroxybenzaldehyde ≥97% 东莨菪内酯即东莨菪素 Gelseminic acid, Chrysatropic acid, 6-Methylesculetin 98% 东莨菪素 Scopoletin ≥98% 椴树苷 Tiliroside ≥98% 莪二酮 Curdione ≥98% 莪术二酮 Curdione ≥98% 杠柳毒苷 Periplocin ≥97% 高车前苷 Homoplantaginin >98% >94% 戈米辛G Gomisin G ≥97% 戈米辛J Gomisin J ≥94% 古伦宾 Columbin ≥95% 光翠雀碱 denudatine ≥95% 桂皮酸 Cinnamic acid 98% 肉桂酸 Cinnamic acid 98% 海柯皂苷元 hecogenin ≥95% 粉防己碱 d-Tetrandrine ≥98% 防己诺林碱 Hanfangchin B(Fangchinoline) ≥98% 2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷 2,3,5,4'-tetera-hydroxystilbene-2-O-β-D-glucoside ≥97% 槲皮素-3-O-葡萄糖苷 Isoquercitrin ≥98% 黄花菜木脂素A Cleomiscosin A ≥95% 黄芪皂苷-Ⅰ AstragalosideⅠ ≥98% Anti-Phospho-LRP6 (Ser1490) 磷酸化低密度脂蛋白受体相关蛋白6抗体 Anti-LRRC4 脑瘤相关基因抗体 Anti-LRRK2 富亮氨酸重复激酶2抗体 Anti-LTB4/Leukotriene B4 白三烯B4抗体 Anti-LTB4-R1 白三烯B4受体1抗体 Anti-LTB4-R2 白三烯B4受体2抗体 Anti-Iumbrokinase 蚓激酶抗体 Anti-Lxn 羧肽酶抑制剂抗体 Anti-Ly-6G/Gr-1 淋巴细胞抗原6G抗体 Anti-LY-86/MD-1 MD-1蛋白抗体 Anti-LY-96/MD-2 MD-2蛋白抗体 Anti-Lysozyme 溶菌酶抗体 Anti-Lyn 膜相关蛋白酪氨酸激酶Lyn抗体 Anti-Phospho-Lyn (Tyr507) 膜相关蛋白酪氨酸激酶Lyn抗体 Anti-Phospho-Lyn (Tyr396) 磷酸化膜相关蛋白酪氨酸激酶Lyn抗体 Anti-Phospho-Lyn (Tyr497) 磷酸化膜相关蛋白酪氨酸激酶Lyn抗体 Anti-LYVE-1 淋巴管内皮透明质酸受体抗体 Anti-M2-PK/PKM2 丙酮酸激酶-M2抗体 Anti-Phospho-PKM2 (Tyr105) 磷酸化丙酮酸激酶M2抗体 Anti-M2-PK (pyruvate Kinase M2) 丙酮酸激酶-M2 anti-Integrin alpha E2 整合素alpha E2 抗体 Anti-Integrin alpha L/CD11a 整合素αL抗体 Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256Anti-CD11b/CD49d 整合素αM/巨噬细胞表面分子抗体 Anti-Integrin Alpha X/CD11c 整合素αX抗体 Anti-MARCO 巨噬细胞清道夫受体抗体 Anti-MARCKS 丙氨酸蛋白激酶C底物Marck 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |