细胞名称 大鼠骨骼肌成肌细胞;L6 形态特性 成肌细胞样 生长特性 贴壁生长 特征特性 该细胞是Yaffe在甲基胆蒽存在的情况下从大鼠大腿肌原代培养的初两代细胞中分离得到的;在培养基中融合形成多核的肌管和横纹肌纤维,细胞融合的程度随着代数的增加而下降,因此细胞应低代次冷冻并周期性地重新克隆以选择融合能力强的细胞。鼠痘病毒阴性。该细胞应在达汇合状态前传代,以延缓细胞分化能力的丧失。 培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;4mM L-glutamine 传代方法 1:20~1:40传代;每周换液2~3次。 传代情况 C3 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 培养法(-) STR - 同工酶 染色体 38~40 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF 准品 Bemotrizinol 200mg 86541-74-4 " 双-乙基乙氧苯酚甲氧苯基三嗪相关物质混合物标准品 " Bemotrizinol Impurity Mixture 100mg 86541-74-4 盐酸贝那普利标准品 Benazepril Hydrochloride 125mg 215447-89-5 贝那普利相关物质A标准品 15mg 贝那普利相关杂质B标准品 15mg 86541-78-8 贝那普利相关物质C标准品 50mg 贝那普利相关物质D标准品 15mg 苯那普利相关化合物E标准品 25mg 109010-60-8 贝那普利相关物质F标准品 15mg 103129-58-4 苯那普利相关化合物G标准品 15mg 73-48-3 苄氟噻嗪标准品 Bendroflumethiazide 200mg 5987-82-6 盐酸奥布卡因标准品 Benoxinate Hydrochloride 200mg 100-52-7 苯标准品 Benzaldehyde (List Chemical) 1ml 8001-54-5 苯扎氯铵标准品 5ml 121-54-0 苄索氯铵标准品 Benzethonium Chloride 500mg 1994-9-7 苯佐卡因标准品 Benzocaine 500mg 65-85-0 苯甲酸标准品 Benzoic Acid 300mg 104-31-4 苯佐那酯标准品 Benzonatate 1g 106-51-4 1,4-苯醌标准品 1,4-Benzoquinone 200mg 121-30-2 苯并噻二嗪相关物质A标准品 100mg 5411-22-3 盐酸苄非他明标准品 200mg 132-17-2 甲磺酰苯扎托品标准品 Benztropine Mesylate 200mg 100-51-6 苯甲醇标准品 Benzyl Alcohol 500mg 120-51-4 苯甲酸苄酯标准品 Benzyl Benzoate 5g 1-苄基-3-甲基-5-氨基吡唑盐酸盐标准品 " 25mg 3818-50-6 羟萘苄芬宁标准品 Bephenium Hydroxynaphthoate 500mg 633-65-8 盐酸黄连素标准品 Berberine Chlor Anti-S100-A9/MRP14/CFAG S100A9抗体 Anti-Shrimp tropomyosin 南美白对虾过敏原蛋白(虾原肌球蛋白)抗体 Anti-SAP-1/Synaptophysin 突触相关蛋白-1/突触素抗体 Anti-SARS putative orflab polyprotein 冠状病毒抗体 Anti-SARS S-protein 兔抗冠状病毒表面S蛋白抗体 Anti-SATB1 核基质结合区结合蛋白1抗体 Anti-Phospho-SATB1 (Ser47) 磷酸化核基质结合区结合蛋白1抗体 Anti-SCF 干细胞生长因子抗体 Anti-SCG3/SgIII 分泌粒蛋白3抗体 Anti-SCN1A SCN1A抗体 Anti-SCN2A SCN2A抗体 Anti-SCN9A/NAV1.7 电压开启的钠离子通道SCN9A抗体 Anti-SCP2/NLTP 固醇携带蛋白2抗体 Anti-SCP3 联会复合体蛋白3抗体 Anti-SCYLV 甘蔗SCYLV抗体 Anti-SDF-1/CXCL12 基质细胞衍生因子-1抗体 Anti-CXCL14 CXC趋化因子14抗体 Anti-Phospho-Aurora B (Thr232)/Aurora C (Thr198) 磷酸化有丝分裂激酶B/C抗体 Anti-Phospho-Aurora A (Thr288) 磷酸化有丝分裂激酶A抗体 大鼠骨骼肌成肌细胞;L6Anti-CXCL16 CXC趋化因子16抗体 Anti-Secretin 分泌素抗体 Anti-Secretin receptor 分泌素受体抗体 Anti-SEL1L SEL1L抗体 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |