细胞名称 大鼠肝细胞瘤;H-4-II-E 形态特性 上皮样 生长特性 贴壁生长 特征特性 可诱导产生芳烃羟化酶,用于检测环境样品或食物提取物中皮克级的多氯联苯有机化合物。 培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS;1%NEAA 传代方法 1:2~1:4传代;2~3天换液1次。 传代情况 C3 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 培养法(-) STR - 同工酶 染色体 44~56 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF C) 1g 137-66-6 维生素C棕榈酸酯标准品 Ascorbyl Palmitate (AS) 2g 90147-43-6 醉茄粉末提取物标准品 Powdered Ashwagandha Extract 1g 70-47-3 无水天冬酰胺标准品 Asparagine Anhydrous 200mg 5794-13-8 一水天冬酰胺标准品 Asparagine Monohydrate 200mg 22839-47-0 阿斯巴甜标准品 Aspartame 200mg 1228222 阿斯巴甜相关物质A标准品 25mg 106372-55-8 阿斯巴甜安赛蜜标准品 Aspartame Acesulfame 200mg 1825910 门冬氨酸标准品 Aspartic Acid 100mg 50-78-2 阿司匹林标准品 Aspirin 500mg 68844-77-9 阿司咪唑标准品 Astemizole 200mg 29122-68-7 阿替洛尔标准品 Atenolol 200mg 344423-98-9 阿托伐他汀钙标准品 Atorvastatin Calcium 100mg 433289-83-9 阿托伐他汀相关物质A标准品 20mg 887196-25-0 阿托伐他汀相关物质B标准品 20mg 693793-53-2 阿托伐他汀相关物质C标准品 20mg 148146-51-4 阿托伐他汀相关物质D标准品 20mg 1105067-88-6 阿托伐他汀相关物质E标准品 10mg 阿托伐他汀钙杂质H对照品标准品 20mg 阿托伐他汀钙杂质I对照品标准品 20mg 95233-18-4 阿托伐醌标准品 Atovaquone 200mg 阿托伐醌相关物质A标准品 25mg 64228-81-5 苯磺酸阿曲库铵标准品 Atracurium Besylate 100mg 70356-09-1 阿伏苯宗标准品 Avobenzone 500mg 12192-57-3 金硫葡糖标准品 Aurothioglucose 100mg 阿扎胞苷相关物质C标准品 ea Anti-Rbms3 抑癌基因Rbms3抗体 Anti-RET/C ret 指状蛋白RET抗体 Anti-Phospho-Ret (Tyr905) 磷酸化指状蛋白RET抗体 Anti-Phospho-Ret (Tyr1062) 磷酸化指状蛋白RET抗体 Anti-Resistin (rat, mouse) 抵抗素抗体(大鼠,小鼠) Anti-Resistin (human, dog) 抵抗素抗体(人,犬) Anti-RELMa 抵抗素样分子α抗体 Anti-RelB 核转录因子NFKB-RelB蛋白抗体 Anti-Phospho-RelB (Ser552) 磷酸化核转录因子NFKB-RelB蛋白抗体 Anti-Reprimo 细胞质内的糖基化蛋白抗体 Anti-C-REL 淋巴细胞衍生C-型凝集素抗体 Anti-RGS2 G蛋白信号转导调节因子2抗体 Anti-RGS5 G蛋白信号转导调节因子5抗体 Anti-RhoA RhoA抗体 Anti-Rho C RhoC抗体 Anti-RIP2 受体结合丝氨酸苏氨酸激酶2抗体 Anti-Phospho-RIP2 (Ser176) 磷酸化受体结合丝氨酸苏氨酸激酶2抗体 Anti-RIP3 受体结合丝氨酸苏氨酸激酶3抗体 Anti-RICTOR 雷帕霉素靶蛋白复合体2抗体 大鼠肝细胞瘤;H-4-II-EAnti-Phospho-Rictor (Thr1135) 磷酸化雷帕霉素靶蛋白复合体2抗体 Anti-RNF126 环指蛋白126抗体 Anti-RNF148 环指蛋白148抗体 Anti-ROCK1 Rho相关蛋白激酶1抗体 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |