细胞名称 大鼠肝细胞;IAR20 形态特性 圆形、多角 生长特性 贴壁生长 特征特性 培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 20%FBS 传代方法 1:3传代;3~4天1次。 传代情况 C5 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 培养法(-) STR - 同工酶 染色体 36~46 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF ted Compound H 20mg 33089-61-1 双甲眯标准品 Amitraz 200mg 549-18-8 盐酸阿米替林标准品 Amitriptyline Hydrochloride 200mg 1210-35-1 阿米替林相关物质A标准品 30mg 1159-03-1 阿米替林相关物质B标准品 25mg 111470-99-6 苯磺酸氨氯地平标准品 Amlodipine Besylate 350mg 113994-41-5 氨氯地平相关物质A标准品 25mg 33434-24-1 季胺基甲基丙烯酸酯共聚物A型标准品 100mg 33434-24-1 季胺基甲基丙烯酸酯共聚物B型标准品 100mg 8000-73-5 碳酸铵标准品 Ammonium Carbonate (AS) 2g 12125-02-9 氯化铵标准品 Ammonium Chloride 200mg 7783-28-0 磷酸氢二铵标准品 1g 57-43-2 异戊巴比妥CII标准品 Amobarbital CII 200mg 6398-98-7 阿莫地喹盐酸盐标准品 Amodiaquine Hydrochloride 500mg 14028-44-5 阿莫沙平标准品 Amoxapine 200mg 61336-70-7 阿莫西林标准品 Amoxicillin 200mg 阿莫西林相关物质A标准品 15mg 阿莫西林相关物质B标准品 15mg 阿莫西林相关物质C标准品 15mg 阿莫西林相关物质G标准品 15mg 阿莫西林相关物质I标准品 15mg 1397-89-3 两性霉素B标准品 125mg 69-53-4 氨苄青霉素标准品 Ampicillin 200mg 69-52-3 氨苄青霉素钠标准品 Ampicillin Sodium 125mg 7177-48-2 氨苄青霉素三水酸标准品 Ampicillin Trihydrate 200mg 121-25-5 安普罗铵标准品 Amprolium 200mg 60719-84-8 氨力农标准品 Amrinone 500mg 62749-46-6 氨力农相关物质A标准品 Amrinone Related Compound A 100mg 氨力农相关物质B标准品 100mg 氨力农相关物质C标准品 Amrinone Related Compound C 50mg 120511-73-1 阿那曲唑标准品 Anastrozole 200mg 5508-58-7 穿心莲内酯标准品 Andrographolide 500mg 90244-84-1 穿心莲提取物标准品 Powdered Andrographis Extract 500mg 醋酸阿奈可他标准品 Anecortave Acetate 200mg 蛋白7抗体 Anti-P-selectin/CD62p P选择素抗体 Anti-L-Selectin/CD62L L选择素抗体 Anti-E-Selectin/CD62E E选择素抗体 Anti-Patched/PTCH Patched/PTCH抗体 Anti-CD63/MLA1 黑色素瘤相关抗原抗体 Anti-CD64/IGFR1 免疫球蛋白G Fc段受体I Anti-CD66a/CEACAM1 癌胚抗原相关细胞粘附分子1抗体 Anti-PTEN/MMAC1(NT) 一种肿瘤抑制基因抗体(N端) Anti-PTEN/MMAC1(CT) 一种肿瘤抑制基因抗体(C端) Anti-Phospho-PTEN (Ser380) 磷酸化肿瘤抑制基因PTEN抗体 Anti-Phospho-PTEN (Ser380/Thr382/Thr383) 磷酸化肿瘤抑制基因PTEN抗体 Anti-PGE2 前列腺素E2抗体 Anti-PTGEs 前列腺素E合成酶抗体 Anti-PTHrP/PTHLH 甲状旁腺激素相关蛋白抗体 Anti-PTN 多效生长因子抗体 Anti-PTP/PTPase/CD148 蛋白酪氨酸磷酸酶CD148抗体 Anti-PTP-1B 蛋白酪氨酸磷酸酶-1B Anti-Parvalbumin 细小清蛋白抗体 Anti-PTTG 垂体肿瘤转化基因抗体 Anti-Peptide YY/PYY 酪酪肽抗体 Anti-Rad17 细胞周期检控Rad17蛋白抗体 Anti-Phospho-Rad17 (Ser645) 磷酸化细胞周期检控Rad17蛋白抗体 大鼠肝细胞;IAR20Anti-Rad51 Rad51抗体 Anti-Rad52 Rad52抗体 Anti-RAD51C 乳癌和卵巢癌易感基因RAD51C抗体 anti-RAP1A 抗Rap1A抗体 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |