细胞名称 大鼠小肠隐窝上皮细胞;IEC-6 形态特性 上皮样 生长特性 贴壁生长 特征特性 皮质醇可抑制该细胞的生长。该细胞表达肠上皮*抗原,在20代以前保持恒定的生长速度和细胞形态,此后生长速度迅速下降,细胞形态也发生改变。 培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 5%FBS;0.01mg/ml Insulin 传代方法 1:3~1:6传代;每周换液2次。 传代情况 P24 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 培养法(-) STR - 同工酶 染色体 40~51 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF g 阿力甜标准品 Alitame 250mg 81403-68-1 盐酸阿夫唑嗪标准品 Alfuzosin Hydrochloride 150mg 阿夫唑嗪系统适应性混合物标准品 15mg 97-59-6 尿囊素标准品 Allantoin 200mg 556-27-4 蒜氨酸标准品 Alliin 25mg 315-30-0 别嘌醇标准品 Allopurinol 250mg 22407-20-1 别嘌醇相关物质B标准品 25mg 别嘌醇相关物质A标准品 50mg 别嘌醇相关物质C标准品 25mg 6994-25-8 别嘌醇相关物质D标准品 35mg 21593-77-1 S-烯丙基-L-半胱氨酸标准品 S-Allyl-L-Cysteine 25mg 31055-19-3 别嘌醇相关物质E标准品 25mg 321571-07-7 别嘌醇相关物质F标准品 25mg 阿莫曲坦标准品 Almotriptan Malate 200mg 依来曲普坦相关物质A标准品 20mg ALPHA-乳白蛋白标准品 400mg 561-78-4 盐酸阿法罗定标准品 Alphaprodine Hydrochloride CII 250mg 28981-97-7 阿普唑仑标准品 Alprazolam CIV 200mg 28910-89-6 阿普唑仑相关物质A标准品 Alprazolam Related Compound A 30mg 745-65-3 前列地尔标准品 Alprostadil 25mg 645-05-6 六甲密胺标准品 Altretamine 500mg 21645-51-2 氢氧化铝胶体标准品 Dried Aluminum Hydroxide Gel 200mg 665-66-7 盐酸金刚烷胺标准品 Amantadine Hydrochloride 200mg 51022-69-6 安西奈德标准品 Amcinonide 200mg 氨磷汀标准品 Amifostine Anti-phospho-Akt (Thr450) 磷酸化蛋白激酶B抗体 Anti-Phospho-HDAC4(Ser246)/HDAC5(Ser259)/HDAC7(Ser155) 磷酸化组蛋白去乙酰化酶4、5、7抗体 Anti-Phospho-HDAC4(Ser632)/HDAC5(Ser498)/HDAC7(Ser486) 磷酸化组蛋白去乙酰化酶4、5、7抗体 Anti-PKN2 蛋白激酶N2抗体 Anti-RKIP Raf激酶抑制蛋白抗体 Anti-PKR 蛋白激酶R抗体 Anti-Phospho-PKR (Thr446) 磷酸化蛋白激酶R抗体 Anti-Phospho-PKR (Thr451) 磷酸化蛋白激酶R抗体 Anti-Phospho-PKR (Thr446/451) 磷酸化蛋白激酶R抗体 Anti-AKT2 蛋白激酶B2 Anti-RBC 人红细胞单抗 Anti-PR (progesterone receptor) 孕激素受体抗体 Anti-Phospho-Progesterone Receptor (Ser190) 磷酸化孕激素受体抗体 Anti-PRAS40/AKT1 substrate 1 蛋白激酶AKT底物1抗体 Anti-Phospho-PRAS40 (Thr246) 磷酸化蛋白激酶AKT底物1抗体 Anti-X protein (N-Terminus) 乙肝病毒X蛋白抗体(N端) Anti-Profilin 1 前纤维蛋白1抗体 Anti-X protein (C-Terminus) 抗乙肝病毒X蛋白抗体(C端) Anti-Profilin 2 前纤维蛋白2抗体 Anti-Protein G 重组蛋白G抗体 Anti-Protein A 重组蛋白A抗体 Anti-RAM-11 RAM-11抗体 Anti-RAMP-1 受体活性修饰蛋白1抗体 Anti-RACK1 受体激活蛋白激酶C1抗体 大鼠小肠隐窝上皮细胞;IEC-6Anti-PRMT1 蛋白质精氨酸甲基转移酶1抗体 Anti-PRCP 脯氨酰羧肽酶抗体 Anti-PRDX3 过氧化还原酶3抗体 Anti-RRM1 核糖核苷酸还原酶1抗体 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |