细胞名称 中国仓鼠卵巢细胞;CHO-HCV-NS2 形态特性 上皮细胞样 生长特性 贴壁生长 特征特性 CHO-HCV-NS2细胞整合有丙型肝炎病毒的NS2基因,能稳定表达NS2蛋白,是HCV基础研究的*摸型。它由武汉大学病毒学国家重点实验室郭佳博士于2008年构建并保存。 培养条件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS 传代方法 1:3传代,2-3天传一代 传代情况 C20 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 阴性 STR 同工酶 同工酶鉴定 染色体 产品图片:
 细胞培养的优点: 1.研究的对象是活细胞 在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。 2.研究条件可以人为控制 pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。 3.研究的样本可以达到比较均一性 通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。 4.研究内容便于观察、检测和记录 采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。 细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。 二.细胞处理: 1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于悬浮细胞,传代可参考以下方法: 方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用: 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28-2003 中4.62,GB/T4789.11-2003)。 英文名称: CD36 肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养(GB标准) 英文名称: KLK11 葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用: 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003 中4.1 GB/T4789.11-2... 英文名称: CD97 哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验,还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称: NTRK3 血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10-... 英文名称: HA 胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用: 可广泛应用于细菌的培养,特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称: HA Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用: 试剂A和试剂B各一支添加于225ml(026080)中配成FB1增菌液。 英文名称: SPARCL1 PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于100ml(026070)中配成PALCAM琼脂。 英文名称: IL1RL1 李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于200ml(026040)中配成LB2增菌液。 英文名称: IL13RA1 李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026040)中配成LB1增菌液。 英文名称: PECAM1 EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用: 每支添加于225ml(026010)中配成EB增菌液。 英文名称: TNF hylcellulose 1g 107-21-1 乙二醇标准品 Ethylene Glycol 0.5ml 104-76-7 2-乙基己醇标准品 2-Ethylhexan-1-ol 1.5ml 88122-99-0 辛基三嗪酮标准品 Ethylhexyl Triazone 200mg 26218-04-2 辛基三嗪酮相关物质A标准品 20mg 辛基三嗪酮相关物质B标准品 20mg 乙基己基三嗪酮相关物质C 辛基三嗪酮相关物质C标准品 20mg 109-94-4 甲酸乙酯标准品 Ethyl Formate 1.2ml×3ampules 106-33-2 十二酸乙酯标准品 Ethyl Laurate 500mg 4940-11-8 乙基麦芽酚标准品 Ethyl Maltol 1g 3198-07-0 盐酸乙基去甲肾上腺素标准品 200mg 5308-25-8 N-乙基标准品 N-Ethylpiperazine 0.5ml 120-47-8 尼泊金乙酯标准品 Ethylparaben 200mg 121-32-4 乙基香兰素标准品 Ethyl Vanillin 200mg 297-76-7 双醋炔诺醇标准品 Ethynodiol Diacetate 200mg 7414-83-7 依替膦酸钠标准品 Etidronate Disodium 200mg 13517-23-2 依替膦酸钠相关物质A标准品 Etidronate Disodium 300mg 25211-86-3 羟基乙叉二膦酸标准品(HEDP) Etidronic Acid Monohydrate 1g 41340-25-4 *度酸标准品 Etodolac 400mg 96382-71-7 非洛地平相关物质A标准品 15mg 43210-67-9 苯硫咪唑标准品 Fenbendazole 100mg 10605-21-7 苯硫咪唑相关物质A标准品 30mg 苯硫咪唑相关物质B标准品 30mg 非诺贝特标准品 Fenofibrate 200mg 67227-57-0 甲磺酸非诺多泮标准品 Fenoldopam Mesylate 200mg 非诺多泮相关物质A标准品 20mg 非诺多泮相关物质B标准品 20mg (Clara细胞分泌蛋白)抗体IgG Anti-CCK8/FITC 荧光素标记胆囊收缩素/缩胆囊素抗体(八肽) Anti-CCL1/I-309/TCA3/FITC 荧光素标记嗜酸粒细胞趋化蛋白CCL1抗体IgG Anti-CCL3/MIP-1 Alpha/FITC 荧光素标记巨噬细胞炎性蛋白1α抗体IgG Anti-CCL4/MIP-1 Beta/FITC 荧光素标记巨噬细胞炎性蛋白1β抗体IgG Anti-CCL5/RANTES/FITC 荧光素标记调节活化的正常T细胞表达和分泌的因子IgG Anti-CCL6/C10/FITC 荧光素标记嗜酸粒细胞趋化蛋白CCL6抗体IgG Anti-CCL9/CCL10/MIP-1 Gamma/FITC 荧光素标记巨噬细胞炎症蛋白-1γ抗体IgG Anti-CCL11/FITC 荧光素标记嗜酸粒细胞趋化蛋白抗体IgG Anti-CCL12/MCP-5/FITC 荧光素标记单核细胞趋化蛋白5抗体IgG Anti-CCL13/MCP-4/FITC 荧光素标记单核细胞趋化蛋白4抗体IgG Anti-CCL14/HCC-1/FITC 荧光素标记嗜酸粒细胞趋化蛋白14抗体IgG Anti-CYLD/cylindromatosis 1/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠微管结合蛋白CYLD抗体IgG Anti-phospho-CYLD(Ser418) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化微管结合蛋白CYLD抗体IgG Anti-CCL15/MIP5/FITC 荧光素标记巨噬细胞炎性蛋白15IgG Anti-CCL16/HCC-4/FITC 荧光素标记巨噬细胞炎性蛋白16抗体IgG Anti-CCL17/TARC/FITC 荧光素标记胸腺活化调节趋化因子抗体IgG Anti-ABCD1/MDC(small inducible cytokine A22 precursor)/FITC 荧光素标记抗嗜酸粒细胞趋化蛋白2抗体IgG 中国仓鼠卵巢细胞;CHO-HCV-NS2Anti-CCL23/MPIF-1/FITC 荧光素标记骨髓抑制因子1抗体IgG Anti-CCL24/Eotaxin-2/FITC 荧光素标记嗜酸粒细胞趋化蛋白24抗体IgG Anti-CCL27/CTACK/FITC 荧光素标记皮肤T细胞虏获趋化因子抗体IgG Anti-CCL26/FITC 荧光素标记 操作方法: 1. 从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打),冰中静置25分钟。 2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。 4. 37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。 (当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟) 5. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |