细胞名称 兔主动脉平滑肌细胞；CCC-SMC-1 形态特性 多角 生长特性 贴壁生长 特征特性 利用2月龄大耳白兔胸腹主动脉，去除内皮，剥离外膜，进行原代培养，经aSMA鉴定纯度，连续培养可传代15次以上。 培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS 传代方法 1:3传代；3~4天1次。 传代情况 P9 冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS 支原体检测 培养法（-） STR - 同工酶 染色体 产品图片：
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 匹克氏肉汤基础 规格: 100g 作用： 用于溶血性链球菌的增菌培养(参考GB/T4789.28－2003 中4.62，GB/T4789.11－2003)。 英文名称： CD36
肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和蜡样芽孢杆菌的培养（GB标准） 英文名称： KLK11
葡萄糖肉浸液肉汤 规格: 250g 作用： 用于溶血性链球菌及其它营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28－2003 中4.1 GB/T4789.11－2... 英文名称： CD97
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验，还用于药品中梭菌的检测。(《中华人民共和国药典》201... 英文名称： NTRK3
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用： 加入脱纤维羊血或兔血，制成血琼脂培养基，用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－... 英文名称： HA
胰蛋白胨大豆肉汤培养基 规格: 250g 作用： 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡... 英文名称： HA
Fraser肉汤增菌液FB1配套试剂 规格: 2x5支 作用： 试剂A和试剂B各一支添加于225ml（026080）中配成FB1增菌液。 英文名称： SPARCL1
PALCAM琼脂冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于100ml（026070）中配成PALCAM琼脂。 英文名称： IL1RL1
李氏增菌液LB2冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于200ml（026040）中配成LB2增菌液。 英文名称： IL13RA1
李氏增菌液LB1冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026040）中配成LB1增菌液。 英文名称： PECAM1
EB增菌液冻干配套试剂 规格: 10支 作用： 每支添加于225ml（026010）中配成EB增菌液。 英文名称： TNF 沙拉沙星（盐酸盐）标准品 ： 91296-87-6 100MG 仲丁胺 标准品 ：13952-84-6 250MG 稀禾定 标准品 ：74051-80-2 10MG 硅醚菊酯 标准品 ：105024-66-6 250MG 西玛津 标准品 ：122-34-9 250mg 硅氟唑 标准品 ：149508-90-7 0.1G 三氯醋酸钠 标准品 ：650-51-1 250mg 壮观霉素（五水二） 标准品 ：22189-32-8 250MG 艾克敌 标准品 ：168316-95-8 0.1 G 螺旋霉素 标准品 ：8025-81-8 100mg 螺螨酯 标准品 ：148477-71-8 100MG 葚孢菌素 标准品 ：118134-30-8 100MG 苯酰磺胺 标准品 ：127-71-9 250MG 乙酰磺胺 标准品 ：144-80-9 250MG 磺胺氯哒嗪 标准品 ：80-32-0 250mg 磺胺嘧啶 标准品 ：68-35-9 100MG 磺胺间二甲氧嘧啶标准品 ： 122-11-2 250MG 磺胺二甲嘧啶 标准品 ：57-68-1 250MG 周效磺胺 标准品 ：2447-57-6 250mg 磺胺胍（一水合物） 标准品 ：6190-55-2 250mg 磺胺甲基嘧啶 标准品 ：127-79-7 250MG 新诺明 标准品 ：723-46-6 250MG 磺胺甲氧哒嗪 标准品 ：80-35-3 250mg 磺胺间甲氧嘧啶钠 标准品 ：1220-83 ry protein 2,MIP-2 ELISA Kit 人巨噬细胞炎性蛋白2 Human gelson ELISA Kit 人凝胶原蛋白 Human talin ELISA Kit 人踝蛋白 Human keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit 人角化细胞内分泌因子 Human ox-LDL ELISA Kit 人氧化低密度脂蛋白 Human ALR ELISA Kit 人肝再生增强因子 Human T-box protein 3 ELISA Kit(human) 人转录因子Tbx3 ELISA试剂盒 human HMGB-1 ELISA Kit 人高迁移率族蛋白B1 ELISA Kit GATA4 ELISA Kit muman 人GATA结合蛋白4 ELISA试剂盒 ACV-RAb(Rat anti-Activin A receptor antibody,ACV-RAb )ELISA Kit 大鼠活化素A受体抗体 NGB(Rat Neuroglobin,NGB) ELISA Kit 大鼠脑红蛋白 TPO(Rat Thrombopoietin,TPO )ELISA kit 大鼠血小板生成素 (BAX)Rat Bcl-2 associated X protein,Bax ELISA Kit 大鼠Bcl-2相关X蛋白 sFAS/Apo-1(Rat soluble Factor-related Apoptosis,sFAS/Apo-1 )ELISA Kit 大鼠可溶性凋亡相关因子 MBP/MBL (Rat Mannma binding protein/mannan binding lectin,MBP/MBL) ELISA Kit Rat Mannma binding protein/mannan binding lectin IL-7(Rat Interleukin-7) ELISA kit 大鼠白介素7 STK(Reat serine/threonine protein kinase,STK) ELISA Kit 大鼠丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶 兔主动脉平滑肌细胞；CCC-SMC-1RBC(Rat anti-red cell antibody )ELISA Kit 大鼠抗红细胞抗体 CD3(Rat Cluster of differentiation 3,CD3) ELISA Kit 大鼠CD3分子 JNK (Rat c-Jun N-terminal kinases,JNK) ELISA Kit 大鼠c-Jun氨基末端激酶 MHB(Rat Methemoglobin,MHB) ELI 操作方法:
1. 从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富，可提高转化效率)。
4. 37℃，225 rpm复苏60分钟或30℃，225 rpm复苏90分钟。
(当质粒中含有不稳定片段时，30℃培养可降低错误重组的概率，若转化control pUC19计算转化效率，则需37℃，225 rpm复苏60分钟）
5. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C. 或LB培养基上。 |
