细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
大鼠气管成纤维分离自气管组织；气管（Trachea），呼吸器官的一部分；为后壁略平的圆筒型管状。上端平第六颈椎下缘，与环状软骨相连；向下至第四、五胸椎体（相当胸骨角平面）交界处，分左、右主支气管，分叉处称为气管杈。气管主要由14-16个半环状软骨构成，有弹性，软骨为“C"字形的软骨环，缺口向后，各软骨环以韧带连接起来，环后方缺口处由平滑肌和致密结缔组织连接，保持了持续张开状态。管腔衬以粘膜，表面覆盖纤毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空气中的灰尘颗粒，纤毛不断向咽部摆动将粘液与灰尘排出，以净化吸入的气体。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的支气管成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。气管成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括：构造和维持组织的正常形态，合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。 方法简介：
实验室分离的大鼠气管成纤维采用胶原酶-联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 质量检测：
实验室分离的大鼠气管成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 大鼠气管成纤维细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 气管 | 产品货号 | YS-01X8252 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息：
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率：每2-3天换液一次 生长特性：贴壁 细胞形态：成纤维细胞样 传代特性：可传3代左右 消化液：0.25% 培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 大鼠气管成纤维体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠内凝集蛋白1(ITLN1)试剂盒 ，英文名： ITLN1 ELISA Kit Monkey soluble vascular cell adhesion molecule 1 (sVCAM-1) ELISA Kit 猴可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)试剂盒 RatGlucose-dependeinsulin-releasingpolypeptide,GIPELISAKit 大鼠葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforGHRP-Ghrelin(Mousegrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin)ELISAKit小鼠生长激素释放肽ghrelin 细胞含量比色法定量试剂盒20次 RatSolubleprotein-100B,S-100BELISAKit大鼠S100B蛋白(S-100B)试剂盒规格：96T/48T 酸性酯酶染液 Eosinstain 中性酯酶染液 H-E dye 碱性酯酶染液 Wright'dye 双重酯酶染液 Wright - Giemsa dye composite G蛋白信号转导调节因子7抗体 豚鼠组胺(HIS)ELISA 试剂盒 96T/48T Human gasic mucin (GM) ELISA Kit 人胃粘液素(GM)试剂盒 Humaotalprostatespecificaigen,tPSAELISAKit 人总前列腺特异抗原(tPSA)试剂盒 96T/48T 进口分装 HumanCreatineKinase,CK试剂盒人肌酸激酶(CK)试剂盒规格：96T/48T 组织DNA损伤彗星荧光试剂盒20次 Humanprostatespecificaigen,PSAELISAKit人前列腺特异性抗原(PSA)试剂盒规格：96T/48T 肌切蛋白抗体 IL10RB重组小鼠 IL10RB / IL10R2 蛋白 Protein EGF样域蛋白7(EGFL7)重组蛋白 Recombinant EGF Like Domain Protein, Multiple 7 (EGFL7) MSLN重组人 MSLN / Mesothelin 蛋白 Protein IFNL3 Protein Human 重组人 IFNL3 / IL28B / Interleukin-28B 蛋白 IL6ST Protein Rat 重组大鼠 gp130 / IL6ST / CD130 蛋白 (His & Fc 标签) 大鼠气管成纤维细胞EGF样域蛋白7(EGFL7)重组蛋白 Recombinant EGF Like Domain Protein, Multiple 7 (EGFL7) IFNL3 Protein Human 重组人 IFNL3 / IL28B / Interleukin-28B 蛋白 IL10RB重组小鼠 IL10RB / IL10R2 蛋白 Protein IL6ST Protein Rat 重组大鼠 gp130 / IL6ST / CD130 蛋白 (His & Fc 标签) MSLN重组人 MSLN / Mesothelin 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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