细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
大鼠直肠黏膜上皮分离自直肠组织；直肠为大肠的未段，位于小骨盆内。上端平第3骶椎处接续乙状结肠，沿骶骨和尾骨的前面下行，穿过盆膈，下端以门而终。直肠上端的大小似结肠，其下端扩大成直肠壶腹，是粪便排出前的暂存部位，下端变细接管。直肠在盆腔内的位置与骶椎腹面关系密切，与骶椎有相同的曲度。直肠周围多脂肪、无纵带，位于膀胱和生殖器官的背侧。直肠的动脉血供主要是来自肠系膜下动脉的直肠上动脉，来自髂内动脉的直肠中动脉和来自髂内动脉的直肠下动脉。肠黏膜上皮细胞是机体内外环境的重要屏障，持续暴露于大量抗原中，也是机体面对病原微生物的第一道防线。因此，肠黏膜上皮细胞除有吸收、分泌和转运等重要生理功能之外，在黏膜先天性和获得性免疫防御机制中也起着重要作用。肠黏膜上皮细胞作为首先接触抗原的细胞，在黏膜免疫反应的起始阶段发挥关键作用，它决定黏膜免疫反应的发生、性质和强度。 方法简介：
实验室分离的大鼠直肠黏膜上皮采用先机械分离法、后胶原酶消化法并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 质量检测：
实验室分离的大鼠直肠黏膜上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 大鼠直肠黏膜上皮细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 直肠 | 产品货号 | YS-01X8274 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
培养信息：
包被条件：鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率：每2-3天换液一次 生长特性：贴壁 细胞形态：上皮细胞样 传代特性：可传1-2代 消化液：0.25% 培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 大鼠直肠黏膜上皮体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠巨噬细胞性蛋白5(MIP5)试剂盒 ，英文名： MIP5 ELISA Kit Monkey acetylcholine receptor aibody (AChRab) ELISA Kit乙酰受体抗体(AChRab)试剂盒 RatgranzymesA,Gzms-AELISAKit 大鼠颗粒酶A(Gzms-A)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforFRA(Humanfibronectioelatedaigen)ELISAKit人纤维连接素相关抗原 细胞肌酸激酶(CK)活性酶动力比色法定量试剂盒25次 RatPhosphorylatedacetyl-CoAcatboxylase,pACCaseELISAKit大鼠0酸化乙酰羧化酶(pACCase)试剂盒规格：96T/48T 生化试剂盒 谷酰胺测试盒 Glamine test kit 谷酸测试盒 Glamate test kit 谷酰胺、谷酸（两种均可测） Glamine and glamic acid (two can be measured) 丙酮酸脱氢酶E2抗体 豚鼠调节激活正常T-细胞表达分泌因子(RAES)试剂盒 ，英文名： RAES ELISA Kit Human secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI) ELISA Kit 人分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)试剂盒 rabbitmacrophageinflammatoryprotein5,MIP-5ELISAKit 兔子巨噬细胞性蛋白5(MIP-5)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforBCDF(HumanBcelldifferetiationfactor)ELISAKit人B细胞分化因子 纤维素分解活力(FIBRINOLYTIC)试剂盒20次 RabbitCollagenaseTypeIIELISAKit兔子胶原酶II(CollagenaseII)试剂盒规格：96T/48T 球蛋白样结构域受体1抗体 CSF3重组人 G-CSF / CSF3 蛋白 (Fc 标签) Protein 神经束蛋白(NFASC)重组蛋白 Recombinant Neurofascin (NFASC) ARF1重组人 ARF1 / ADP-ribosylation factor 1 蛋白 Protein IL12A Protein Human 重组人 IL12A / NKSF1 蛋白 HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 大鼠直肠黏膜上皮细胞神经束蛋白(NFASC)重组蛋白 Recombinant Neurofascin (NFASC) IL12A Protein Human 重组人 IL12A / NKSF1 蛋白 CSF3重组人 G-CSF / CSF3 蛋白 (Fc 标签) Protein HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 ARF1重组人 ARF1 / ADP-ribosylation factor 1 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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