细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

大鼠棕色脂肪干分离自棕色脂肪组织；动物体内存在棕色和白色两种脂肪，白色脂肪堆积在皮下，负责储存多余热量；棕色脂肪负责分解引发肥胖的白色脂肪，将后者转化成二氧化碳、水和热量，本身不储存热量。棕色脂肪组织呈棕色，其特点是组织中有丰富的毛细血管，脂肪细胞内散着许多小脂滴，线粒体大而丰富，核圆形，位于细胞中央，这种脂肪细胞也称为多泡脂肪细胞。棕色脂肪组织在成年动物极少，新生儿及冬眠动物较多，在新生儿主要分布在肩胛间区、腋窝及颈后部等处。棕色脂肪组织仅在婴儿时期发挥作用，它们堆积在新生儿肩胛处，帮助维持体温。随着年龄增长，棕色脂肪会逐渐消失。终，动物体内只残存少量棕色脂肪细胞，分布于颈部和锁骨。脂肪干细胞（ADSCs）是一种具有多向分化潜能的干细胞，主要恢复组织细胞的修复功能，促进细胞的再生，恢复年轻面容的同时，身体机能也得到充分改善，有效改善亚健康、早衰等疾病，由内而外真正的有效抵抗衰老。脂肪干细胞具有很多优点：①具有自我更新及多向分化的潜能；②来源充足；③对供区的创伤较小；④获得率及体外扩增速率高。脂肪干细胞是目前被广泛应用于组织工程领域中理想的种子细胞。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠棕色脂肪干采用胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠棕色脂肪干经CD90免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

大鼠甘肽/甘素(GAL)试剂盒 ，英文名： GAL ELISA Kit

Porcine thyroopin releasing hormone (H) ELISA Kit 猪促甲状腺素释放激素(H)试剂盒

转基因植物NOS基因核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

CLIAKitforMCP-4/CCL13(Humanmonocytechemotacticprotein4)ELISAkit人单核细胞趋化蛋白4

体液唾液酸(SA)比色法定量试剂盒50次

ELISAKitIL-1β绵羊白介素1β

血栓素A2   英文名称：   Human Thromboxane A2   英文缩写：   TXA2

血栓素B2   英文名称：   Human Thromboxane B2   英文缩写：   TXB2

血栓素B2   英文名称：   Human Thromboxanes B2   英文缩写：   TXB2

甲状腺球蛋白抗体   英文名称：   Human Thyroglobulin Aibody   英文缩写：   TGAb

FLJ37424蛋白抗体

小鼠脂肪甘油三酯酯酶(ATGL)试剂盒 96T/48T

Human ai hepatitis B virus core aibody IgM (HBcAb-IgM) ELISA Kit 人抗乙型肝病毒核心IgM抗体(HBcAb-IgM)试剂盒

Humanneuophilicalkalinephosphatase,NAPELISAKit 人中性粒细胞碱性0酸酶(NAP)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforAACT(HumanAlpha1Aichymoypsin)ELISAKit人α1抗胰

抗原修复溶液50毫升

MouseNeuroophin3,-3ELISAKit小鼠神经营养因子3(-3)试剂盒规格：96T/48T

Bruton酪激酶抑制剂蛋白抗体

EPHA4重组小鼠 EphA4 / HEK8 蛋白 Protein

Apelin receptor/APJ receptor Apelin receptor抗原 0.5mgApelin receptor/APJ receptor Apelin receptor抗原

MFGE8重组人 MFG-E8 / lactadherin / MFGE8 蛋白 Protein

CCL15 Protein Human 重组人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113， His 标签)

CD70 Protein Rat 重组大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (Fc 标签)

大鼠棕色脂肪干细胞白介素2(IL2)重组蛋白 Recombinant Interleukin 2 (IL2)

CCL15 Protein Human 重组人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113， His 标签)

XCL1重组小鼠 XCL1 蛋白 Protein

IL2RA Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IL2RA 蛋白

CKB重组人 CKB / Creatine kinase B type 蛋白 Protein

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。