细胞简介：

人瘢痕疙瘩成纤维分离自皮肤瘢痕疙瘩组织；瘢痕疙瘩，俗称疤痕疙瘩，是皮肤伤口愈合或不明原因所致皮肤损伤愈合后所形成的过度生长的异常瘢痕组织，目前学术界认为各种原因导致的瘢痕如具有以下特点，可诊断为瘢痕疙瘩：①病变超过原始皮肤损伤范围；②呈持续性生长；③高起皮肤表面、质硬韧、颜色发红的结节状、条索状或片状肿块。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的瘢痕疙瘩成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。瘢痕疙瘩成纤维细胞同正常皮肤成纤维细胞在形态上没有表现出明显的差异。瘢痕疙瘩成纤维细胞生长同正常皮肤成纤维细胞的生长没有明显的差别。癜痕成纤维细胞对血清的依赖性低于正常皮肤成纤维细胞。

方法简介：

公司实验室分离的人瘢痕疙瘩成纤维采用先消化、后-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人瘢痕疙瘩成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次；

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传3-5代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的产品：

大鼠钙激活1(CAPN1)试剂盒 ，英文名： CAPN1 ELISA Kit

Porcine telomerase (TE) ELISA Kit 猪端粒酶(TE)试剂盒

转基因植物TE基因核酸试剂盒 48T

CLIAKitforMCAb(Mousemelanocyteaibody)ELISAKit小鼠黑色素细胞抗体

体液血管紧张素Ⅰ转化酶1(ACE1)活性荧光共振能量转移法(FRET)定量试剂盒20次

ELISAKitIgE马免疫球蛋白E

血清游离（FC）含量测定试剂盒   可见分光光度法   50管/48样

乙酰酯酶（AchE）试剂盒   可见分光光度法   50管/48样

组织及血液酸性0酸酶（ACP）试剂盒   可见分光光度法   50管/24样

组织及血液碱性0酸酶（AKP/ALP）试剂盒   可见分光光度法   50管/24样

KLK3单克隆抗体

小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human ai scleroderma aibody 70 (SCL70/topo 1) ELISA Kit 人抗硬皮病抗体70(SCL70/topoⅠ)试剂盒

Humahymus-dependeaigen,TD-AgELISAKit 人依赖性抗原(TD-Ag)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforAAA(HumanAi-adrenocoicalaibody)ELISAKit人抗肾上腺皮质抗体

胰岛素细胞脂肪诱导生成比色法定量试剂盒20次

MouseNeuroglobin,NGBELISAKit小鼠脑红蛋白(NGB)试剂盒规格：96T/48T

FAM126B蛋白抗体

NTRK1重组大鼠 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 标签) Protein

DR3/TRAMP (death receptor-3 0.5mgDR3/TRAMP (death receptor-3) DR3 死亡受体(抗原)

CTNNB1重组人 beta-Catenin / CTNNB1 蛋白 (His & GST 标签) Protein

CCL15 Protein Human 重组人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 46-113, His 标签)

CD36 Protein Mouse 重组小鼠 CD36 / SCARB3 蛋白

人瘢痕疙瘩成纤维细胞DR3/TRAMP (death receptor-3 0.5mgDR3/TRAMP (death receptor-3) DR3 死亡受体(抗原)

CCL15 Protein Human 重组人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 46-113, His 标签)

NTRK1重组大鼠 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 标签) Protein

CD36 Protein Mouse 重组小鼠 CD36 / SCARB3 蛋白

CTNNB1重组人 beta-Catenin / CTNNB1 蛋白 (His & GST 标签) Protein