细胞简介：

人表皮成纤维分离自皮肤组织；表皮位于动物皮肤的外层，由胚胎时期外胚层形成，具有抗摩擦和抗损伤的作用。表皮是皮肤的浅层结构，由复层扁平上皮构成。从基底层到表面可分为五层，即基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的表皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

方法简介：

公司实验室分离的人表皮成纤维采用先消化、后-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人表皮成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的产品：

大鼠肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)试剂盒 ，英文名： SP-A ELISA Kit

Porcine soluble P selectin (sP-S 猪可溶性P选择素(sP-S

猪特定基因序列(Porcine)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

CLIAKitforMAP-2(Humanmicrotubule-associatedprotein2)ELISAKit人微管相关蛋白2

体液氧化应激活性氧(ROS)荧光测定试剂盒(过氧亚硝基阴离子)20次

ELISAKitIGFBP-3胰岛素样生长因子结合蛋白3

血清低密度脂蛋白（LDL）测试盒   Two semi test case

血清高密度脂蛋白（HDL）测试盒   HCV test kit

葡萄糖（Glu）测试盒   Surface aigen (enzymatic method) test case

（半自动/手工）   A test box

PRDM锌指转录因子PRDM4抗体

小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC) ELISA 试剂盒 96T/48T

Human ai neuophil / cenosome aibody (ACA) ELISA Kit 人抗中性粒/中心体抗体(ACA)试剂盒

Humanai-OJ-aibody，OJ/IleRSELISAKit 人OJ抗体/抗异亮氨酰NA合成酶抗体(OJ/IleRS)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforABeta1-42(Humanamyloidbetapeptide1-42)ELISAKit人β淀粉样蛋白1-42

乙醇福尔马林固着液(Formalin-Alcoholic)50毫升

MouseN-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKPELISAKit小鼠N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯(AcSDKP)试剂盒规格：96T/48T

ISLR2蛋白抗体

EFNA5重组小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签) Protein

AQP-2 (aquaporin Protein-2 0.5mgAQP-2 (aquaporin Protein-2) 水通道蛋白-2(抗原)

IL36A重组人 IL1F6 / IL36A 蛋白 Protein

CCL17 Protein Human 重组人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白

CD79B Protein Rat 重组大鼠 CD79B / B29 蛋白

人表皮成纤维细胞AQP-2 (aquaporin Protein-2 0.5mgAQP-2 (aquaporin Protein-2) 水通道蛋白-2(抗原)

CCL17 Protein Human 重组人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白

EFNA5重组小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签) Protein

CD79B Protein Rat 重组大鼠 CD79B / B29 蛋白

IL36A重组人 IL1F6 / IL36A 蛋白 Protein