细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
人表皮角质形成分离自皮肤组织；表皮位于动物皮肤的外层，由胚胎时期外胚层形成，具有抗摩擦和抗损伤的作用。表皮是皮肤的浅层结构，由复层扁平上皮构成。从基底层到表面可分为五层，即基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层。表皮角质形成细胞是一种能合成角质蛋白的上皮细胞，此类细胞为表皮的主体，由表皮深层始逐渐增殖、分化，并在成为角化的角质细胞中，细胞核与细胞器消失，细胞亦失去生理功能而脱落。未脱落部分对机体尚有保护作用，故不必在洗擦身体时用力搓擦，使其过早脱失。表皮角质形成细胞主要分布于表皮基底层，在上皮程序性死亡后，细胞产生角化并移向表皮。体外培养的表皮角化细胞容易导致终末分化，不能充分增殖。角质形成细胞终产生角质蛋白，在其向角质细胞演变过程中，一般可以分为四层，即基底层、棘层、颗粒层以及角质层。有人把前三层或前二层称为生发层或马尔匹基层。此外，在某些部位，特别在掌跖部位，角质层下方还可见到透明层。 方法简介：
公司实验室分离的人表皮角质形成层细胞先消化、后-胶原酶混合消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的人表皮角质形成经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 人表皮角质形成细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 皮肤组织 | 产品货号 | YS-01X7364 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
培养信息：
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 上皮细胞样 传代特性 可传1-2代 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)试剂盒 ，英文名： BMP-2 ELISA Kit Porcine procollagen peptide (P III NP) ELISA Kit 猪Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)试剂盒 埃博拉病毒(EBOV)核酸试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T CLIAKitforMIP-5(Humanmacrophageinflammatoryprotein5)ELISAKit人巨噬细胞性蛋白5 体液结构型内皮细胞合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性比色法定量试剂盒20次 ELISAKitCD8犬白细胞分化抗原8 血红素氧化酶 (HO-1) 作用： ELISA 热休克蛋白 27(HSP27) 作用： ELISA 热休克蛋白 70(HSP70) 作用： ELISA HA 丝酸肽酶 1 (Ha1) 作用： ELISA 2'-5'-寡腺苷酸合成酶3抗体 小鼠载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA 试剂盒 96T/48T Human ai neuophil aibody (ANA) ELISA Kit 人抗中性粒细胞抗体(ANA)试剂盒 Humacellreceptor,TCRELISAKit 人T细胞受体(TCR)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforABeta1-40ELISAKit大鼠β淀粉样蛋白1-40 乙基十六烷基二甲基溴化胺(cetyldimethylethammoniumbromide)1公斤 Mousemyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAKit小鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCAIgG)试剂盒规格：96T/48T 肿瘤高表达细胞周期相关蛋白抗体 NA重组甲型流感 H1N1 神经酶 (Neuraminidase / NA) (H274Y mutation) (高活性) Protein Rad51 Rad51抗原 0.5mgRad51 Rad51抗原 GFRA1重组人 GFRA1 / GFRα1 / GDNFRA 蛋白 Protein CCL18 Protein Human 重组人 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白 FAS Protein Human 重组人 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 蛋白 (Fc 标签) 人表皮角质形成细胞Rad51 Rad51抗原 0.5mgRad51 Rad51抗原 CCL18 Protein Human 重组人 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白 NA重组甲型流感 H1N1 神经酶 (Neuraminidase / NA) (H274Y mutation) (高活性) Protein FAS Protein Human 重组人 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 蛋白 (Fc 标签) GFRA1重组人 GFRA1 / GFRα1 / GDNFRA 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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