细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
兔气管平滑肌分离自气管组织；气管（Trachea），呼吸器官的一部分；为后壁略平的圆筒型管状。上端平第六颈椎下缘，与环状软骨相连；向下至第四、五胸椎体（相当胸骨角平面）交界处，分左、右主支气管，分叉处称为气管杈。气管主要由14-16个半环状软骨构成，有弹性，软骨为“C"字形的软骨环，缺口向后，各软骨环以韧带连接起来，环后方缺口处由平滑肌和致密结缔组织连接，保持了持续张开状态。管腔衬以粘膜，表面覆盖纤毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空气中的灰尘颗粒，纤毛不断向咽部摆动将粘液与灰尘排出，以净化吸入的气体。气管平滑肌是气管的重要结构组成之一，在机体的正常生理过程中发挥着重要作用；能够保持气道张力，维持气道管状形态，从而有利于气体流通，保持肺部通气。气管平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。气管平滑肌细胞的异常是呼吸道疾病的重要病理特征之一，其增生、肥大是气道重塑的关键。 方法简介：
公司实验室分离的兔气管平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合组织贴块法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的兔气管平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 兔气管平滑肌细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 气管 | 产品货号 | YS-01X7092 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 成纤维细胞样 传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠重肽神经丝蛋白(NEFH)试剂盒 ，英文名： NEFH ELISA Kit Mouse perinuclear ai neuophil cytoplasmic aibody (pANCA) ELISA Kit 小鼠抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)试剂盒 MouseBonemorphogeneticproteieceptorⅡ,BMPR-ⅡELISAKit 小鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforHumanInsulieceptorBeta,ISR-BetaELISAKIT人胰岛素受体β 微型RNA(miRNA)扩增试剂盒20次 ELISAKitMIP-3β大鼠巨噬细胞性蛋白3β 小鼠甲状旁腺激素(PTH)试剂盒 96T/48T 小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)试剂盒 96T/48T 小鼠甲基化酶(Methylase)试剂盒 96T/48T 小鼠己糖激酶(HK)试剂盒 96T/48T 环指蛋白156抗体 小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA 试剂盒 96T/48T Human prostatic acid phosphatase (PAP) ELISA Kit 人前列腺酸性0酸酶(PAP)试剂盒 HumanleukocyteaigenG,HLA-GELISAKit 人类白细胞抗原G(HLA-G)试剂盒 96T/48T 进口分装 Humanadrenalcoexaibody,ACA试剂盒人肾上腺皮质抗体(ACA)试剂盒规格：96T/48T 植物a-(a-AMYLASE)活性比色法定量试剂盒20次 Mouseadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISAKit小鼠能a1A受体(ADRA1A)试剂盒规格：96T/48T 吞噬细胞运动蛋白2抗体 THY1重组食蟹猴 CD90 / THY-1 蛋白 Protein IQGAP1 支架蛋白抗原 0.5mgIQGAP1 支架蛋白抗原 DDOST重组人 DDOST / OST48 蛋白 Protein DCBLD1 Protein Human 重组人 Discoidin / DCBLD1 蛋白 PDPN Protein Mouse 重组小鼠 Podoplanin / PDPN 蛋白 兔气管平滑肌细胞IQGAP1 支架蛋白抗原 0.5mgIQGAP1 支架蛋白抗原 DCBLD1 Protein Human 重组人 Discoidin / DCBLD1 蛋白 THY1重组食蟹猴 CD90 / THY-1 蛋白 Protein PDPN Protein Mouse 重组小鼠 Podoplanin / PDPN 蛋白 DDOST重组人 DDOST / OST48 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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