细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
兔肾小球内皮分离自肾组织；肾脏是机体的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物，同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质，如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、等，以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能，生成肾素、促红细胞生成素、活性D3、前列腺素、激肽等，又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能，保证了机体内环境的稳定，使新陈代谢得以正常进行。肾小球是肾元中的用于将血液过滤生成原尿的一团毛细血丛，被鲍氏囊所包裹，是尿液形成的重要构造。血液经由入球小动脉进入肾小球。肾小球内的微血管不像其他微血管，汇流入静脉，而是流入出球小动脉。在肾小球内，微血管受到高压，而加速了超滤作用（hyperfiltration）的进行。微血管中的血液经由超滤作用之后，形成滤液，渗入鲍氏囊内。肾小球与鲍氏囊合称为肾小体，肾小球的过滤速率便称为肾小球过滤率。肾小球内皮细胞是一类特殊微血管类型的细胞。细胞为圆形、多角形，单层贴壁生长；细胞质丰富，细胞核为圆形或卵圆形。肾小球内皮细胞被覆于肾小球毛细血管壁腔侧，与血流直接接触，是肾小球滤过膜的道屏障，可粘附细菌和白细胞，修复基底膜，并有抗凝、抗血栓的作用；所以，体外培养的肾小球内皮细胞在免疫学和病理生理学领域中具有重要的研究价值。 方法简介：
实验室分离的兔肾小球内皮采用先机械研磨过不锈钢网筛分离得到肾小球、后用胶原酶消化，结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 质量检测：
实验室分离的兔肾小球内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 兔肾小球内皮细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 肾 | 产品货号 | YS-01X7957 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 内皮细胞样 |
培养信息：
包被条件：PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%） 培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率：每2-3天换液一次 生长特性：贴壁 细胞形态：内皮细胞样 传代特性：可传2-3代 消化液：0.25% 培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 兔肾小球内皮体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠血管内皮生长因子C(VEGFC)试剂盒 ，英文名： VEGFC ELISA Kit Mouse noradrenaline (NA) ELISA Kit 小鼠去甲(NA)试剂盒 Mousemonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP-1/MCAFELISAkit 小鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforHumanbactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPIELISAKit人杀菌性/通透性增加蛋白 细胞EPHA1激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次 ELISAKitPP大鼠蛋酸酶 小鼠红细胞生成素受体(mouse EPOR) 作用： ELISA 小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(mouse ECP) 作用： ELISA 小鼠上皮中性粒细胞活化肽-78(mouse ENA-78) 作用： ELISA 小鼠血管内皮抑素(mouse Endostatin) 作用： ELISA 乳酸菌S-层蛋白抗体 小鼠颗粒酶A(Gzms-A)ELISA 试剂盒 96T/48T Rat ai alpha fodrin aibody IgG/IgA (-Fodrin IgG/IgA) ELISA Kit 大鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)试剂盒 Humanglycosylatedserumprotein,GSPELISAKit 人糖化蛋白(GSP)试剂盒 96T/48T 进口分装 HumanAlpha-fetoprotein,AFP试剂盒人甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)试剂盒规格：96T/48T 植物半胱(cysteine)含量高效液相色谱法定量试剂盒20次 Monkeyβ2-microglobulin,BMG/β2-MGELISAKit猴β2微球蛋白(BMG/β2-MG)试剂盒规格：96T/48T 1号染色体开放阅读框190抗体 LEPR重组人 Leptin Receptor / LEPR / CD295 蛋白 (His & Fc 标签) Protein 糖原合酶激酶3α(GSK3α)重组蛋白 Recombinant Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha (GSK3a) CNPY3重组人 CNPY3 / PRAT4A / ERDA5 蛋白 (Fc 标签) Protein DLL4 Protein Human 重组人 DLL4 / Delta4 蛋白 HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Egypt/N05056/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 兔肾小球内皮细胞糖原合酶激酶3α(GSK3α)重组蛋白 Recombinant Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha (GSK3a) DLL4 Protein Human 重组人 DLL4 / Delta4 蛋白 LEPR重组人 Leptin Receptor / LEPR / CD295 蛋白 (His & Fc 标签) Protein HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Egypt/N05056/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 CNPY3重组人 CNPY3 / PRAT4A / ERDA5 蛋白 (Fc 标签) Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
|
