细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

兔小肠隐窝上皮分离自小肠组织；小肠位于腹中，上端接幽门与胃相通，下端通过阑门与大肠相连，是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内，上连胃幽门，下接盲肠，分为十二指肠、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的，因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后，基本上完成了消化过程，同时营养物质被小肠粘膜吸收了。小肠管壁由粘膜、粘膜下层、肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞，粘膜有许多绒毛，绒毛根部的上皮下陷至固有层，形成管状的肠腺，其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切；构成肠腺的细胞有柱状细胞、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和内分泌细胞与绒毛上皮相似，接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似，绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短，不形成纹状缘。小肠有三种功能即消化、吸收和分泌及运动功能，其中以吸收和分泌功能为主。小肠腔面的环行皱襞从幽门附近开始出现，在十二指肠末段和空肠头段极发达，向下逐渐减少和变矮，至肠中段以下基本消失。粘膜表面还有许多细小的肠绒毛，是由上皮和固有层向肠腔突起而成，形状不一，以十二指肠和空肠头段发达。绒毛于十二指肠呈叶状，于空肠呈指状，于回肠则细而短。环行皱襞和绒毛使小肠表面积扩大20-30倍，绒毛根部的上皮下隐至固有层形成管状的小肠腺，又称肠隐窝，故小肠腺与绒毛的上皮是连续的，小肠腺直接开口于肠腔。

方法简介：

实验室分离的兔小肠隐窝上皮采用先机械分离法、后胶原酶消化法并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的兔小肠隐窝上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件：鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：上皮细胞样

传代特性：可传1-2代

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

兔小肠隐窝上皮体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

大鼠天冬酸转酶(AST)试剂盒 ，英文名： AST ELISA Kit

Mouse myelin basic protein (MBP) ELISA Kit 小鼠髓0脂碱性蛋白(MBP)试剂盒

Rati-iodothyronine,T3ELISAKit 大鼠三甲状腺原(T3)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHO-1ELISAKit大鼠血红素氧合酶1

细胞PKCγ激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKi-proBNP大鼠N端前脑素

小鼠巯基转移酶（GST）试剂盒   96T/48T

小鼠过氧化酶（GSH-Px）试剂盒   96T/48T

小鼠(GSH)试剂盒   96T/48T

小鼠谷酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)试剂盒   96T/48T

雄激素受体相关蛋白24抗体

小鼠抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA 试剂盒 96T/48T

Ai endothelial cell aibodies (AECA) in rat ELISA Kit 大鼠抗内皮细胞抗体(AECA)试剂盒

HumanflagellinELISAKit 人鞭毛蛋白(flagellin)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanAngiotensinⅡReceptor2,AT2R试剂盒人血管紧张素Ⅱ受体2(AT2R)试剂盒规格：96T/48T

植物甘油-3-0酸脱氢酶(Glycerol-3-PhosphateDehydrogenase)总活性比色法定量试剂盒20次

Humanβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit人β血小板球蛋白/β血栓环蛋白(β-TG)试剂盒规格：96T/48T

NF-kappa-B抑制子epsilon抗体

CD99L2重组小鼠 CD99L2 / MIC2L1 蛋白 (Fc 标签) Protein

Bad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter 0.5mgBad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter) 相关死亡促进因子Bad抗原

SELM重组人 SELM / Selenoprotein M 蛋白 Protein

DUSP3 Protein Human 重组人 DUSP3 / VHR 蛋白 (His & GST 标签)

TNFSF8 Protein Rat 重组大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 标签)

兔小肠隐窝上皮细胞Bad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter 0.5mgBad (BCL-xL/BCL-2-associated death promoter) 相关死亡促进因子Bad抗原

DUSP3 Protein Human 重组人 DUSP3 / VHR 蛋白 (His & GST 标签)

CD99L2重组小鼠 CD99L2 / MIC2L1 蛋白 (Fc 标签) Protein

TNFSF8 Protein Rat 重组大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (Fc 标签)

SELM重组人 SELM / Selenoprotein M 蛋白 Protein

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。