细胞简介： 
兔心肌成纤维分离自心脏组织；心脏由心肌细胞和非心肌细胞组成，非心肌细胞占细胞总数的70%，其中90%以上的非心肌细胞由心肌成纤维细胞组成。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的心肌成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。近年来，人们逐渐了解到非心肌细胞不仅对心肌细胞具有结构上的支持、保护作用，而且还具有自分泌和旁分泌功能，影响心肌细胞的结构和生理功能；心肌成纤维细胞主要功能为对心肌细胞起结构支持作用并负责细胞基质外的合成，当心肌损伤时能产生旁分泌生长因子。心肌成纤维细胞是心脏结缔组织中常见的细胞，可合成和分泌胶原纤维、弹性纤维、网状纤维及有机基质，并且在外伤等因素刺激下，部分纤维细胞可重新转变为幼稚的成纤维细胞，其功能活动也得以恢复，参与组织损伤后的修复。因此，对心肌成纤维细胞的生理学研究成为现代心血管领域研究的一个重点。 方法简介：
实验室分离的兔心肌成纤维采用胶原酶-联合消化结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 质量检测：
实验室分离的兔心肌成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 兔心肌成纤维细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 心脏 | 产品货号 | YS-01X8144 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息：
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率：每2-3天换液一次 生长特性：贴壁 细胞形态：成纤维细胞样 传代特性：可传5代左右；3代以内状态佳 消化液：0.25% 培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 兔心肌成纤维体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。 
细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的产品：
大鼠抗胰岛细胞抗体(ICA)试剂盒 ，英文名： ICA ELISA Kit Mouse mucin / mucin 5AC (MUC5AC) ELISA Kit 小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)试剂盒 RatiactParathormone,i-PTHELISAKit 大鼠全段甲状旁腺素(i-PTH)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforFS(MouseFollistatin)ELISAKit小鼠卵泡抑素 细胞环氧化酶(CYCLOOXYGENASE-2)活性荧光定量试剂盒20次 Ratplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISAKit大鼠纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)试剂盒规格：96T/48T 小鼠孤儿受体配体 英文名称： Mouse Aemin 英文缩写： A 小鼠α葡萄糖苷酶 英文名称： Mouse α Glucosidase 英文缩写： AG 小鼠雄激素 英文名称： Mouse Androgen 英文缩写： ADG 酰基氧化酶 英文名称： Mouse Acyl-CoA oxidase 英文缩写： ACO 癌胚抗原单克隆抗体 小鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA 试剂盒 96T/48T Human heat shock protein 90 (HSP-90) ELISA Kit 人热休克蛋白90(HSP-90)试剂盒 HumanCaveolin-1,Cav-1ELISAKIT 人窖蛋白Caveolin1(Cav-1)试剂盒 96T/48T 进口分装 humanangiotensinⅡreceptoypeⅠa,AgⅠa试剂盒人血管紧张素Ⅱ受体Ⅰa型(AgⅠa)试剂盒规格：96T/48T 植物高内质网分离试剂盒10次 Humanβ-subunitsofhemoglobin,HB-βELISAKit人血红蛋白β亚基(HB-β)试剂盒规格：96T/48T 磷酸化组胺受体H1抗体 EPHA4重组大鼠 EphA4 蛋白 Protein GLUT12 葡萄糖转运蛋白12 0.5mgGLUT12 葡萄糖转运蛋白12 STXBP3重组人 STXBP3 / UNC-18C 蛋白 (His & GST 标签) Protein DYDC2 Protein Human 重组人 DYDC2 / DPY30 domain containing 2 蛋白 (GST 标签) SRC Protein Mouse 重组小鼠 SRC Kinase / Proto-oncogene c-Src 蛋白 (His & GST 标签) 兔心肌成纤维细胞GLUT12 葡萄糖转运蛋白12 0.5mgGLUT12 葡萄糖转运蛋白12 DYDC2 Protein Human 重组人 DYDC2 / DPY30 domain containing 2 蛋白 (GST 标签) EPHA4重组大鼠 EphA4 蛋白 Protein SRC Protein Mouse 重组小鼠 SRC Kinase / Proto-oncogene c-Src 蛋白 (His & GST 标签) STXBP3重组人 STXBP3 / UNC-18C 蛋白 (His & GST 标签) Protein
|
