细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
兔视网膜Muller分离自视网膜组织；视网膜居于眼球壁的内层，是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成，两层间在病理情况下可分开，称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连，由色素上皮细胞组成，它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层，由外向内分别为：色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜，有感光作用；后部鼻侧有一视神经乳头。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。神经元是视细胞层，专司感光，它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上，而视锥细胞则在中心凹处多。层叫双节细胞，约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相联系，负责联络作用。第三层叫节细胞层，专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构，它贴于眼球的后壁部，传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面，经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的，在黄斑区，其分辨能力强。视网膜Muller细胞作为视网膜中的主要胶质细胞，大约占视网膜胶质细胞的90%，因而在视网膜疾病中起着何种作用也受到越来越多的关注。在超微结构水平上，Muller细胞的胞质似乎比临近的其他细胞更高的电子密度，更发达的内质网，细胞核是典型的卵圆形或多角形。但在不同物种中或同一物种中的不同部位，Muller细胞形态也会有所差异的。视网膜Muller细胞是一种特化的神经胶质细胞，不仅具有维持视网膜的正常结构和功能的作用，并调制视网膜神经元活动，还能参与多种病理过程，尤其是眼底增殖性病变，如增生性玻璃体视网膜病变、增生性糖尿病视网膜病变等，体外培养Muller细胞是研究这些增殖性病变途径之一。 方法简介：
实验室分离的兔视网膜Muller采用胶原酶消化法和反复消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 质量检测：
实验室分离的兔视网膜Muller经GS免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 兔视网膜Muller细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 视网膜 | 产品货号 | YS-01X7865 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 梭形、多角形 |
培养信息：
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率：每2-3天换液一次 生长特性：贴壁 细胞形态：梭形、多角形 传代特性：可传2-3代 消化液：0.25% 培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 兔视网膜Muller体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠角蛋白18(K18)试剂盒 ，英文名： K18 ELISA Kit Mouse neuophil chemoatacta protein 2 (NAP-2/CXCL7) ELISA Kit 小鼠中性粒细胞趋化蛋白2(NAP-2/CXCL7)试剂盒 RatAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISAKit 大鼠抗平滑肌抗体(ASMA)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforFishCoisolELISAKit鱼类 细胞基质金属蛋白酶(MMP-10)活性荧光定量试剂盒20次 RatOsteopoin,OPNELISAKit大鼠骨桥素(OPN)试剂盒规格：96T/48T 小鼠固 英文名称： Aldosterone 英文缩写： ALD 小鼠白蛋白 英文名称： Albumin 英文缩写： ALB 小鼠乙酰羧化酶 英文名称： Mouse Acetyl Coenzyme A Carboxylase 英文缩写： ACC 小鼠乙酰 英文名称： Mouse Acetylcholine 英文缩写： ACH 4号染色体开放阅读框43/FLJ11184抗体 小鼠抗盐抵抗的酸性0酸酶(AP)试剂盒 96T/48T Human heat shock protein 60 (Hsp-60) ELISA Kit 人热休克蛋白60(Hsp-60)试剂盒 HumanPolySeriumAigen,PHSAELISAKit 人多聚血清蛋白(PHSA)试剂盒 96T/48T 进口分装 Humanangiostatin,ANG试剂盒人血管抑素/血管稳定蛋白(ANG)试剂盒规格：96T/48T 植物钙调蛋白(CaM)活性酶连续循环比色法定量试剂盒20次 Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISAKit鸡17羟皮质类固醇(17-OHCS)试剂盒规格：96T/48T 配对盒基因8兔单克隆抗体 ANGPT2重组小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 蛋白 Protein 碱性鞘0脂0酸二酯酶(Alk-Smase)重组蛋白 Recombinant Alkaline Sphingomyelinase (Alk-Smase) PLS3重组人 PLS3 / Plastin 3 蛋白 Protein DOT1L Protein Human 重组人 DOT1L / KMT4 蛋白 CD8A Protein Ferret 重组雪貂 CD8A / CD8 alpha chain 蛋白 兔视网膜Muller细胞碱性鞘0脂0酸二酯酶(Alk-Smase)重组蛋白 Recombinant Alkaline Sphingomyelinase (Alk-Smase) DOT1L Protein Human 重组人 DOT1L / KMT4 蛋白 ANGPT2重组小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 蛋白 Protein CD8A Protein Ferret 重组雪貂 CD8A / CD8 alpha chain 蛋白 PLS3重组人 PLS3 / Plastin 3 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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