细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
兔食管上皮分离自食管组织；食管是咽和胃之间的消化管，食管在系统发生上起初很短，随着颈部的伸长和心肺的下降，而逐渐增长。食管可分为颈段、胸段和腹段。脊椎动物食管的颈段位于气管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之间的纵膈内，胸段通过膈孔与腹腔内腹相连，腹段很短与胃相连。在发育过程中，食管的上皮细胞增殖，由单层变为复层，食管使管腔变狭窄，甚至一度闭锁，以后管腔又重新出现。哺乳动物的食管结构上由内向外分四层：黏膜层、黏膜下层、肌层和外膜。其中，黏膜层，包括上皮、固有层和黏膜肌层。上皮为较厚的未角化的复层扁平上皮，耐摩擦，有保护作用。在食管与胃贲门交界处，复层扁平上皮突然变成单层柱状上皮。食管被一层线性排列的、无角化、潮湿的复层扁平上皮细胞覆盖，其顶端细胞膜和细胞间连接复合体联合在一起产生有效渗透屏障，防止食管内容物的渗入。特别的是，层屏障使表层细胞的基质外侧细胞膜和深层细胞的全部细胞膜不暴露于食管腔内规律的大幅波动的渗透压之下。从组织学上讲，食管上皮由两层组成，基底层和分化层；其中，仅基底层的细胞可以增殖，然后向食管腔移行。移行过程伴随有分化的发生和分化标记的依序表达。食管上皮细胞的培养是研究食管正常生理机制和食管癌变机制的非常好的体外模型。 方法简介：
实验室分离的兔食管上皮采用-胶原酶联合消化法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 质量检测：
实验室分离的兔食管上皮经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 兔食管上皮细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 食管 | 产品货号 | YS-01X8115 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 上皮细胞样 |
培养信息：
包被条件：鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率：每2-3天换液一次 生长特性：贴壁 细胞形态：上皮细胞样 传代特性：可传1-2代 消化液：0.25% 培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 兔食管上皮体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠接触蛋白3(CN3)试剂盒 ，英文名： CN3 ELISA Kit Mouse neuophil gelatinase associated lipocalin (NGAL) ELISA Kit 小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)试剂盒 RatThrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit 大鼠纤溶抑制因子/激活的纤溶抑制物(TAFI)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforFishOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAkit鱼骨钙素/骨谷蛋白 细胞基质金属蛋白酶(MMP1/8/13)原位明胶酶谱法(insituzymography)荧光染色试剂盒20次 RatOsteoprotegerin,OPGELISAKit大鼠骨保护素(OPG)试剂盒规格：96T/48T 小鼠核因子kb（NF-kb）试剂盒 96T/48T 小鼠汉坦病毒（HV）试剂盒 96T/48T 小鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)试剂盒 96T/48T 小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)试剂盒 96T/48T 3号染色体开放阅读框18抗体 小鼠抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA 试剂盒 96T/48T Human chemokine (FK) ELISA Kit 人趋化因子(FK)试剂盒 HumanSurfaceMembraneImmunoglobulin,SmIgELISAKit 人细胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)试剂盒 96T/48T 进口分装 Humanalveolibasememembranezoneaibody,ABM-Ab试剂盒人抗肺泡基底膜抗体(ABM-Ab)试剂盒规格：96T/48T 植物超氧化物阴离子荧光法定量试剂盒20次 MonkeyIerleukin4,IL-4ELISAKit猴白介素4(IL-4)试剂盒规格：96T/48T 牛血清白蛋白多克隆抗体 CD86重组食蟹猴 CD86 / B7-2 蛋白 (Fc 标签) Protein LH(Luteinizing Hormone 0.5mgLH(Luteinizing Hormone) 人促黄体生成素(多肽) PHPT1重组人 PHPT1 / PHP14 蛋白 Protein DNAJC30 Protein Human 重组人 DNAJC30 蛋白 NLGN1 Protein Mouse 重组小鼠 Neuroligin 1 / NLGN1 蛋白 兔食管上皮细胞LH(Luteinizing Hormone 0.5mgLH(Luteinizing Hormone) 人促黄体生成素(多肽) DNAJC30 Protein Human 重组人 DNAJC30 蛋白 CD86重组食蟹猴 CD86 / B7-2 蛋白 (Fc 标签) Protein NLGN1 Protein Mouse 重组小鼠 Neuroligin 1 / NLGN1 蛋白 PHPT1重组人 PHPT1 / PHP14 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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