细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
兔牙周膜干分离自牙周膜组织；牙周膜（牙周韧带、牙周间隙）是由致密结缔组织所构成。多数纤维排列成束，纤维的一端埋于牙骨质内，另一端则埋于牙槽窝骨壁里，使牙齿固位于牙槽窝内；牙周膜内有神经、血管、淋巴和上皮细胞等。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）来源于胚胎时期的中胚层组织，具有很强的自我复制和多向分化潜能，具有向脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞及肌细胞等多种终末细胞定向分化的能力，运用 MSCs来修复软骨损伤具有很好的应用前景，目前已能够从骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等组织以及羊水、脐带、脐带血中分离和制备间充质干细胞。牙周膜干细胞参与了牙周组织的病变、修复及再生过程。现在，利用牙周膜干细胞建立体外模型，已经成为有关员研究牙周组织疾病的重要手段。 方法简介：
实验室分离的兔牙周膜干采用胶原酶消化结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 质量检测：
实验室分离的兔牙周膜干经CD44免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 兔牙周膜干细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 牙周膜 | 产品货号 | YS-01X7970 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息：
培养基：含FBS、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等 换液频率：每2-3天换液一次 生长特性：贴壁 细胞形态：成纤维细胞样 传代特性：可传3代左右 消化液：0.25% 培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 兔牙周膜干体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠白细胞介素18(IL-18)试剂盒 ，英文名： IL-18 ELISA Kit Mouse macrophage inflammatory protein 5 (MIP-5) ELISA Kit 小鼠巨噬细胞性蛋白5(MIP-5)试剂盒 MouseLebtospiraIgGELISAKit 小鼠钩端IgG(Lebtospira)试剂盒 96T/48T 进口分装 CLIAKitforHumanNOD-likereceptor9,NLRELISAKit人NOD样受体 同位素真菌/酵母细胞蛋白核酸结合凝胶迁移电泳分析试剂盒20次 ELISAKitsLR大鼠可溶性瘦素受体 小鼠低氧诱导因子1α(mouse HIF-1α) 作用： ELISA 小鼠热休克蛋白60(mouse Hsp-60) 作用： ELISA 小鼠组胺(mouse HIS) 作用： ELISA 小鼠肝生素(mouse HGF) 作用： ELISA 胞浆蛋白SH3GL3抗体 小鼠结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA 试剂盒 96T/48T Human papilloma virus aibody IgG (HPV-IgG) ELISA Kit 人状瘤病毒抗体IgG(HPV-IgG)试剂盒 Huma-cellacelymphoblasticleukemiaaigen,TALLA-1ELISAKit 人T细胞急性淋巴母细胞白血病相关抗原(TALLA-1/CD231)试剂盒 96T/48T 进口分装 Humanai-cardiolipinaibodyIgM,ACA-IgM试剂盒人抗心0脂抗体IgM(ACA-IgM)试剂盒规格：96T/48T 植物黑色素含量比色法定量试剂盒20次 Humanα-enolase,αENOLELISAKit人α烯醇化酶(αENOL)试剂盒规格：96T/48T 磷酸化14-3-3E蛋白抗体 CSF3R重组人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白 (Fc 标签) Protein 神经肽S(NPS)重组蛋白 Recombinant Neuropeptide S (NPS) PGK2重组人 Phosphoglycerate Kinase 2 / PGK2 蛋白 Protein EFNA3 Protein Human 重组人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 兔牙周膜干细胞神经肽S(NPS)重组蛋白 Recombinant Neuropeptide S (NPS) EFNA3 Protein Human 重组人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 CSF3R重组人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白 (Fc 标签) Protein HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 PGK2重组人 Phosphoglycerate Kinase 2 / PGK2 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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