细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
兔子宫成纤维分离自子宫组织；子宫是孕育胎儿的器官，位于盆腔中部，膀胱与直肠之间，其位置可随膀胱与直肠的充盈程度或体位而有变化。子宫的正常位置主要依靠子宫诸韧带、盆膈、尿生殖膈及会阴中心腱等结构维持，这些结构受损或松弛时，可以引起子宫脱垂。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的子宫成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。子宫成纤维细胞的主要特征：①是子宫的重要细胞组成，在体外易于培养；②在子宫损伤后能修复和重塑子宫；③在子宫炎症时能有效控制炎症扩散。 方法简介：
公司实验室分离的兔子宫成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的兔子宫成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 兔子宫成纤维细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 子宫组织 | 产品货号 | YS-01X7136 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 成纤维细胞样 传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠白介素26(IL-26)试剂盒 ，英文名： IL-26 ELISA Kit Mouse leukoiene C4 (LTC4) ELISA Kit 小鼠白三烯C4(LTC4)试剂盒 ELISA 小鼠IgG(mouse IgG) 进口分装 CLIAKitforIL-9ELISAKit大鼠白介素9 通用型果胶生物酶比色法定量试剂盒20次 ELISAKitAChRab大鼠乙酰受体抗体 小鼠促卵泡素(FSH)试剂盒 96T/48T 小鼠促甲状腺素释放激素(H)试剂盒 96T/48T 小鼠促甲状腺素(TSH)试剂盒 96T/48T 小鼠促黄体激素(LH)试剂盒 96T/48T CD74单克隆抗体 小鼠碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)ELISA 试剂盒 96T/48T Human bactericidal peptide (cecropin) ELISA Kit 人杀菌肽(cecropin)试剂盒 HumancecropinELISAKit 人杀菌肽(cecropin)试剂盒 96T/48T 进口分装 Humanai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgA试剂盒人抗肌内膜抗体IgA(EMAIgA)试剂盒规格：96T/48T 植物甲基化组蛋白H3-K9染色质免疫沉淀分析(CHIP)试剂盒10次 Humanvoltage-gatedcalciumchannel,VGCCELISAKit人钙离子通道抗体(VGCC)试剂盒规格：96T/48T 鸟苷酸环化酶激活蛋白1抗体 IL17A重组绒猴 IL17 / IL17A 蛋白 Protein Nociceptin 孤菲肽(痛敏肽 0.2mgNociceptin 孤菲肽(痛敏肽)(抗原) CSNK2A2重组人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白 (His & GST 标签) Protein EMC8 Protein Human 重组人 EMC8 / COX4NB / NOC4 蛋白 SELP Protein Mouse 重组小鼠 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白 兔子宫成纤维细胞Nociceptin 孤菲肽(痛敏肽 0.2mgNociceptin 孤菲肽(痛敏肽)(抗原) EMC8 Protein Human 重组人 EMC8 / COX4NB / NOC4 蛋白 IL17A重组绒猴 IL17 / IL17A 蛋白 Protein SELP Protein Mouse 重组小鼠 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白 CSNK2A2重组人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白 (His & GST 标签) Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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