细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

兔表皮角化分离自皮肤组织；表皮位于动物皮肤的外层，由胚胎时期外胚层形成，具有抗摩擦和抗损伤的作用。表皮是皮肤的浅层结构，由复层扁平上皮构成。从基底层到表面可分为五层，即基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层。表皮角化细胞（KC）是构成表皮的主要细胞成分，在体内处于不断增殖过程中，分裂的角化细胞主要位于其基底层，少数位于棘细胞层。随着向表层的推移，细胞的分化程度逐渐增加，并丧失分裂活性。

方法简介：

实验室分离的兔表皮角化先消化、后-胶原酶混合消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的兔表皮角化经PCNA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件：鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：上皮细胞样

传代特性：可传1-2代

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

兔表皮角化体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

兔子白三烯B4(LTB4)ELISA 试剂盒

Human vascular endothelial cell adhesion molecule 1 (VCAM-1/CD106) ELISA Kit 人血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)试剂盒

Humanai-neuroblastoma-aibody,NB-AbELISAKit 人抗神经母细胞瘤抗体(NB-Ab)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanEsogeeceptor,ER试剂盒人雌激素受体(ER)试剂盒规格：96T/48T

组织SPRK1激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

humanorosomucoid2,ORM2ELISAKit人类粘蛋白2(ORM2)试剂盒规格：96T/48T

人转录激活因子4(ATF4)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human ATF4 (Activating anscription Factor 4) ELISA Kit

人转录激活因子6(ATF6)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human ATF6 (Activating anscription Factor 6) ELISA Kit

人腺苷三0酸结合盒转运体G1(ABCG1)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human ABCG1 (ATP Binding Cassette anspoer G1) ELISA Kit

人腺苷三0酸结合盒转运体A1(ABCA1)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human ABCA1(ATP Binding Cassette anspoer A1) ELISA Kit

src原癌基因抗体

豚鼠甘油-3-0酸脱氢酶(GAPDH)试剂盒 ，英文名： GAPDH ELISA Kit

Human paraoxonase (PON) ELISA Kit 人酶(PON)试剂盒

RabbitProgesterone,PROGELISAKit 兔子孕激素/孕酮(PROG)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBF(HumanfactorB)ELISAKit人B因子

细菌糖酵解溴百里酚蓝(BTB)试剂盒20次

rabbitiercellularadhesionmolecule2,ICAM-2ELISAKit兔子细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)试剂盒规格：96T/48T

磷酸化酪蛋白激酶casein kinase Iα抗体

GB重组巨细胞病毒 HCMV Glycoprotein B / gB 蛋白 Protein

TM(Thrombomodulin 0.5mgTM(Thrombomodulin) 血栓调节蛋白多肽

PARP1重组人 PARP-1 / PARP 蛋白 Protein

IL3 Protein Human 重组人 IL3 / IL-3 蛋白

HAVCR1 Protein Human 重组人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 蛋白

兔表皮角化细胞TM(Thrombomodulin 0.5mgTM(Thrombomodulin) 血栓调节蛋白多肽

IL3 Protein Human 重组人 IL3 / IL-3 蛋白

GB重组巨细胞病毒 HCMV Glycoprotein B / gB 蛋白 Protein

HAVCR1 Protein Human 重组人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 蛋白

PARP1重组人 PARP-1 / PARP 蛋白 Protein

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。