细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞简介：

兔大隐静脉内皮分离自大隐静脉；大隐静脉起于足背静脉弓内侧端，经内踝前方，沿小腿内侧缘伴隐神经上行，经股骨内侧髁后方，进入大腿内侧部，与股内侧皮神经伴行，逐渐向前上，在耻骨结节外下方穿隐静脉裂孔，汇入股静脉，其汇入点称为隐股点。有5条属支：旋髂浅静脉、腹壁浅静脉、外静脉、股内侧浅静脉和股外侧浅静脉，它们汇入大隐静脉的形式多样，相互间吻合丰富。大隐静脉曲张行高位结扎时，须分别结扎、切断各属支，以防复发。大隐静脉内皮细胞对维持大隐静脉动态平衡起着重要作用。它们合成、分泌凝血和纤溶系统的激活因子和抑制因子、影响血小板粘附和聚集的调节因子；大隐静脉内皮细胞还释放控制细胞增殖和调节血管壁紧张度的分子。

方法简介：

实验室分离的兔大隐静脉内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的兔大隐静脉内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件：PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：内皮细胞样

传代特性：可传2-3代

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

兔大隐静脉内皮体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

公司正在出售的产品：

豚鼠白介素18(IL-18)试剂盒 ，英文名： IL-18 ELISA Kit

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人中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)试剂盒   96T/48T

人中期因子(MK)试剂盒   96T/48T

人脂氧素A4(LXA4)试剂盒   96T/48T

人脂0壁酸(LTA)试剂盒   96T/48T

NDUF3蛋白抗体

豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒 ，英文名： SOD ELISA Kit

Human polymorphonuclear leukocyte elastase (PMN Elastase) ELISA Kit 人多形核白细胞弹性蛋白酶(PMN Elastase)试剂盒

rabbitCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit 兔子Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBetaGD(MouseBeta-glucuronidase)ELISAKit小鼠β葡萄糖酸苷酶

细菌纤维素酶(cellulase)活性荧光定量试剂盒20次

RabbitHighmobilitygroupproteinB1,HMGB-1ELISAKit兔子高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)试剂盒规格：96T/48T

相关抗原6抗体

DDC重组小鼠 DOPA Decarboxylase / DDC 蛋白 Protein

α1-酸性糖蛋白(α1AGP)重组蛋白 Recombinant Alpha-1-Acid Glycoprotein (a1AGP)

PPIL1重组人 PPIL1 蛋白 Protein

IL5RA Protein Human 重组人 IL5Ra / CD125 蛋白

ENPP3 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 ENPP3 / CD203c 蛋白

兔大隐静脉内皮细胞甘露聚糖结合凝集素关联丝蛋白酶2(MASP2)重组蛋白 Recombinant Mannose Associated Serine Protease 2 (MASP2)

IL5RA Protein Human 重组人 IL5Ra / CD125 蛋白

PTK6重组小鼠 PTK6 / Brk 蛋白 (His & GST 标签) Protein

FCGR2B Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 标签)

ERBB3重组人 HER3 / ErbB3 蛋白 (Fc 标签) Protein

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。