MT人褪黑素ELISA试剂盒

大鼠内皮型一氧化氮合成酶ELISA检测eNOS    anti-chromosome Ab人抗染色体抗体酶联免疫 
大鼠脂蛋白磷脂酶A2ELISA检测Lp-PL-A2    anti-cartilage-Ab人抗软骨抗体酶联免疫 
大鼠热休克蛋白90ELISA检测HSP-90    ANP小鼠心钠肽酶联免疫
大鼠热休克蛋白70ELISA检测HSP-70    ANP人心钠肽酶联免疫  
MT人褪黑素ELISA试剂盒  途：
用GsaR人促胃液素受体ELISA试剂盒 的含量。

大鼠热休克蛋白40ELISA检测HSP-40    ANNA-2/Ri人抗神经元核抗体2型/抗Ri抗体酶联免疫 
大鼠热休克蛋白20ELISA检测HSP-20    ANNA-1/Hu人抗神经元核抗体1型/抗Hu抗体酶联免疫 
大鼠β淀粉样蛋白1-40ELISA检测Aβ1-40    ANKRD1人心肌锚蛋白重复域1酶联免疫
大鼠细胞周期素D3ELISA检测Cyclin-D3    Ank-B人锚蛋白B酶联免疫
大鼠细胞周期素D2ELISA检测Cyclin-D2    ANG人血管抑素/血管稳定蛋白酶联免疫 
大鼠细胞周期素D1ELISA检测Cyclin-D1    ANG人血管生长素酶联免疫
大鼠髓磷脂碱性蛋白ELISA检测MBP    ANG大鼠血管生长素酶联免疫

步骤一

双抗体夹心法

1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。

2.　加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。

3.　加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。

4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。

5.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

6.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。

然而，影响Elisa试验结果的因素很多，故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。