ProGRP人胃泌素释放肽前体ELISA试剂盒  

ET人内毒素酶联免疫    PPARGC1人过氧化物酶体增殖激活物受体γ辅激活因子1α酶联免疫
PPAR-γ人过氧化物酶体增殖因子活化受体γ 酶联免疫    PON人对氧磷酶酶联免疫 
CsA人环孢素A酶联免疫    POMC人阿黑皮素原酶联免疫
GFAP人神经胶质纤维酸性蛋白酶联免疫    poly-IgR人多免疫球蛋白受体酶联免疫
15-LO/LOX人15脂加氧酶酶联免疫    PNA花生凝集素酶联免疫 
ProGRP人胃泌素释放肽前体ELISA试剂盒   途：
用于定量检测血清、血浆及相关液体样本中 的含量。

CETP人胆固醇酯转移蛋白酶联免疫    PM-Scl/PM-1人抗多发性肌炎硬皮病抗体酶联免疫 
LTC4人白三烯C4酶联免疫    PMN Elastase人多形核白细胞弹性蛋白酶酶联免疫
Cyt-C人细胞色素C酶联免疫    pMHC人肽-主要组织相容性复合体复合物酶联免疫
LPL人脂蛋白脂酶酶联免疫    PL人胎盘泌乳素酶联免疫
GP-II糖原磷酸化酶同工酶II酶联免疫    PLSCR1人磷脂爬行酶1酶联免疫
GP-MM人糖原磷酸化酶同工酶MM酶联免疫    PLP人甲状旁腺激素样蛋白酶联免疫
GP-BB人糖原磷酸化酶同工酶BB酶联免疫    PLP人蛋白脂质蛋白抗体酶联免疫
Lp-α人脂蛋白α酶联免疫    PLN人受磷蛋白酶联免疫
Cr人骨胶原交联酶联免疫    Plg兔子纤溶酶原酶联免疫 
CⅠCP人Ⅰ型前胶原C末端肽酶联免疫    Plg人纤溶酶原酶联免疫 
DPD人脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉酶联免疫    PLGF人胎盘生长因子酶联免疫

步骤一

双抗体夹心法

1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃ 过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。

2.　加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。（同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔）。

3.　加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体（经滴定后的稀释度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小时，洗涤。

4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。

5.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

6.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm（若以ABTS显色，则410nm）处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。

ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。

然而，影响Elisa试验结果的因素很多，故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。