NT-3人神经营养因子3ELISA试剂盒 anti-RV人抗狂犬病毒抗体ELISA检测 CA-2小鼠碳酸酐酶2酶联免疫 anti-HAV人抗甲型肝炎病毒IgM抗体ELISA检测 CA-2人碳酸酐酶2酶联免疫 anti-HAV人抗甲型肝炎病毒IgG抗体ELISA检测 CA-2大鼠碳酸酐酶2酶联免疫 anti-PIV IgM人抗副流感病毒IgM抗体ELISA检测 CA242人胰腺癌标志物酶联免疫 NT-3人神经营养因子3ELISA试剂盒用 途: 用于定量检测血清、血浆及相关液体样本中盒 的含量。 anti-HDV人抗丁型肝炎病毒抗体ELISA检测 CA199小鼠胃肠癌标志物酶联免疫 anti-HCV人抗型肝炎病毒抗体ELISA检测 CA199人胃肠癌标志物酶联免疫 anti-typhus-Ab人抗斑疹伤寒抗体ELISA检测 CA19-9人糖链抗原19-9酶联免疫 LLO人单核细胞增多性李斯特菌素OELISA检测 CA153小鼠乳腺癌标志物-酶联免疫 HBxAg人乙型肝炎病毒X抗原ELISA检测 CA153人乳腺癌标志物-酶联免疫 AAV人腺相关病毒ELISA检测 CA125小鼠卵巢癌标志物酶联免疫 HBXIP人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白ELISA检测 CA125人卵巢癌标志物酶联免疫 St-Ag人伤寒抗原ELISA检测 C7人补体7酶联免疫 HTLV-Ⅰ人类嗜T淋巴细胞Ⅰ型病毒ELISA检测 C5b人补体片断5b酶联免疫 MV人麻疹病毒ELISA检测 C5a小鼠补体片断5a酶联免疫 EP人流行性腮腺炎ELISA检测 C5a人补体片断5a酶联免疫 EHF人抗流行性出血热病毒抗体IgG ELISA检测 C5a大鼠补体片断5a酶联免疫 人痢疾内阿米巴抗原ELISA检测 C4小鼠补体蛋白4酶联免疫 Lyme-IgG人莱姆IgGELISA检测 C4兔子补体蛋白4酶联免疫 PEB1人空肠弯曲菌黏附蛋白ELISA检测 C4人补体蛋白4酶联免疫 步骤方法一 双抗体夹心法 1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。 2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。 3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。 4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。 6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。 然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。 |