ICAM-3/CD50人细胞间粘附分子3ELISA试剂盒 histon-H2b小鼠组蛋白H2b酶联免疫 GCP-2/CXCL6人粒细胞趋化蛋白-2酶联免疫 VCAM-1/CD106小鼠血管内皮细胞粘附分子1酶联免疫 GCK人葡萄糖激酶酶联免疫 GR小鼠糖皮质类固醇受体酶联免疫 GCA人胃泌素细胞抗体酶联免疫 LHRH小鼠黄体生成素释放激素酶联免疫 Gbp4人鸟苷酸结合蛋白4酶联免疫 NGB小鼠脑红蛋白酶联免疫 GBM人抗肾小球基底膜抗体酶联免疫 ICAM-3/CD50人细胞间粘附分子3ELISA试剂盒用 途: 用于定量检测血清、血浆及相关液体样本中 的含量。
8-iso-PG小鼠8异前列腺素酶联免疫 GA植物赤霉素酶联免疫 IFI16/p16小鼠γ干扰素诱导蛋白16/p16酶联免疫 GATA4小鼠GATA结合蛋白4酶联免疫 SDF-1a/CXCL12小鼠基质细胞衍生因子1a酶联免疫 GATA4大鼠GATA结合蛋白4酶联免疫 VEGF小鼠血管内皮细胞生长因子酶联免疫 GAP人GTP酶活化蛋白酶联免疫 GMP-140小鼠血浆α颗粒膜蛋白酶联免疫 GAP-43人生长相关蛋白43酶联免疫 MPO小鼠髓过氧化物酶酶联免疫 GAL人甘肽/甘素酶联免疫 Gzms-B小鼠颗粒酶B酶联免疫 Gal人α半乳糖基抗体酶联免疫 VEGFR-1/Flt1小鼠血管内皮细胞生长因子受体1酶联免疫 GAL大鼠甘肽/甘素酶联免疫 Gzms-A小鼠颗粒酶A酶联免疫 Gal-6S小鼠半乳糖6硫酸酯酶酶联免疫 Lptn/LTN/XCL1小鼠淋巴细胞趋化因子酶联免疫 Gal-6S人半乳糖6硫酸酯酶酶联免疫 VEGFR-2/Flk-1小鼠血管内皮细胞生长因子受体2酶联免疫 GAG人糖胺聚糖酶联免疫 TCC C5b-9小鼠末端补体复合物C5b-9酶联免疫 GAD人谷氨酸脱羧酶酶联免疫 VEGFR-3/Flt-4小鼠血管内皮细胞生长因子受体-3酶联免疫 GAD-Ab小鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体酶联免疫 C4小鼠补体蛋白4酶联免疫 GAD-Ab人谷氨酸脱羧酶自身抗体酶联免疫 Renin小鼠肾素酶联免疫 GAD-Ab大鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体酶联免疫 α2-AP小鼠α2抗纤溶酶酶联免疫 GABA小鼠γ氨基丁酸酶联免疫 步骤方法一 双抗体夹心法 1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。 2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。 3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。 4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。 6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。 然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。 |