ASMA人抗平滑肌抗体酶联免疫 GSTs人谷胱甘肽S转移酶酶联免疫 Human Methylase ELISA GS人凝溶胶蛋白酶联免疫 Human methotrexate,MTX ELISA GTE-AGE人肾小球组织糖基化终末产物酶联免疫 Human Methemoglobin,MHB ELISA Gzms-A人颗粒酶A酶联免疫 Human metanephrine,MN ELISA ASMA人抗平滑肌抗体酶联免疫 用 途: 用于定量检测血清、血浆及相关液体样本中 的含量。 Gzms-B人颗粒酶B酶联免疫 Human Metallothionein,MT ELISA H2A-H2B人抗组蛋白-DNA抗体/抗二聚体-DNA抗体酶联免疫 Human Metallothionein 2,MT2 ELISA H2-K1人组织相容性2-K1-K 区酶联免疫 Human membrane IgM,mIgM ELISA HAase人透明质酸酶酶联免疫 Human membrane IgD,mIgD ELISA HABP人透明质酸结合蛋白酶联免疫 Human membrane IgA,mIgA ELISA HA人透明质酸酶联免疫 Human membrane cofactor protein,MCP ELISA HA人血凝素酶联免疫 Human membrane attack complex,MAC ELISA HBcAb-IgM人抗乙型肝炎病毒核心IgM抗体酶联免疫 Human Melatonin,MT ELISA HBcAb人抗乙型肝炎病毒核心抗体酶联免疫 Human melatonin sulfate,MS ELISA HBeAb人抗乙型肝炎病毒e抗体酶联免疫 Human melanomaderived leucine zipper extra-nuclear factor,MLZE ELISA HBsAb人抗乙型肝炎病毒表面抗体酶联免疫 Human melanoma metastasis surface adhesion molecule,MMSAM ELISA HBsAg人乙型肝炎表面抗原酶联免疫 Human Melanoma Marker A,MART/Melan-A ELISA HBV preS2Ab人乙型肝炎病毒前S2抗体酶联免疫 Human melanocyte stimulating hormone,MSH ELISA HBV preS2Ag人乙型肝炎病毒前S2抗原酶联免疫 Human melanocyte antibody,MC Ab ELISA HBxAg人乙型肝炎病毒X抗原酶联免疫 Human measlesvirus IgM,MV IgM ELISA HBXIP人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白酶联免疫 human MAX dimerization protein 1,mxd1 ELISA HCⅡ人肝素辅因子Ⅱ酶联免疫 Human maturation promoting factor,MPF ELISA 操作步骤方法一 双抗体夹心法 1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。 2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。 3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。 4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。 6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。 然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。 |