ASD人雄烯二酮酶联免疫 GM-CSF Ab人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子抗体酶联免疫 Human myelin basic protein autoantibody,MBP ELISA GM-CSF人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子酶联免疫 Human Mycoplasma pneumoniae antibody,MP-Ab ELISA GM人胃粘液素酶联免疫 Human muscarinic acetylcholine receptor,M-AChR ELISA ASD人雄烯二酮酶联免疫 用 途: 用于定量检测血清、血浆及相关液体样本中 的含量。 GOD人葡萄糖氧化酶酶联免疫 Human muscarinic acetylcholine receptor M3,M-AChR M3 ELISA GOT/GPT人天门冬氨酸转氨酶/谷草转氨酶酶联免疫 human Mus musculus similar to 60S ribosomal protein L12,LOC382344 ELISA gp130人糖蛋白130酶联免疫 Human multidrug resistance-associated protein,MRP ELISA gp210人抗核膜糖蛋白210抗体酶联免疫 Human Mullerian Inhibiting Substance/Anti-Mullerian hormone,MIS/AMH ELISA Gp49a人糖蛋白49A酶联免疫 Human Mucin-7,MUC7 ELISA GP-BB人糖原磷酸化酶同工酶BB酶联免疫 Human mucin-5 subtype B,MUC5B ELISA GPC-3人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3酶联免疫 Human Mucin-5 subtype AC,MUC5AC ELISA GP-II糖原磷酸化酶同工酶II酶联免疫 Human Mouse myeloperoxidase-antineutrophil cytoplasmic antibody IgG,MPO-ANCA IgG ELISA GPI人葡萄糖6磷酸异构酶酶联免疫 Human Motilin,MTL ELISA GPI人糖磷脂酰肌醇酶联免疫 Human Mothers against decapentaplegic homolog 7,Smad7 ELISA GP-MM人糖原磷酸化酶同工酶MM酶联免疫 Human Mothers against decapentaplegic homolog 1,Smad1 ELISA GP人抗糖蛋白抗体酶联免疫 Human morbillivirus,MV ELISA 操作步骤方法一 双抗体夹心法 1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。 2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。 3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。 4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。 5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。 6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。 ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。 然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。 |