细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
鸡前脂肪分离自脂肪组织；脂肪组织主要由大量群集的脂肪细胞构成，聚集成团的脂肪细胞由薄层疏松结缔组织分隔成小叶；贮存的脂肪，在需要时可迅速分解成甘油和脂肪酸，经血液输送到各组织以供利用。它们影响胰岛素敏感性、血压水平、内皮功能、纤溶活动及炎症反应，参与多种重要病理生理过程；脂肪组织已由过去单纯作为能量储存的器官而成为一个极其重要的内分泌系统。脂肪组织在体内含有两种主要的细胞：一种是在胞浆内积聚脂滴的成熟脂肪细胞；另一种是虽未在胞浆内积聚脂滴但有这种潜能的前脂肪细胞。前脂肪细胞呈梭形，有分裂和增殖的能力；成熟的脂肪细胞呈圆形，已经失去了分裂及增殖的能力。由于前脂肪细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分化能力的特异化前体细胞，与肥胖有着非常密切的关系。前脂肪细胞是一种类成纤维细胞，在演变的过程中不断吸收脂质，终成为成熟的脂肪细胞。前脂肪细胞对外界机械损伤的抵抗力较强，可望成为软组织缺损的有益填充物。 方法简介：
公司实验室分离的鸡前脂肪采用胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的鸡前脂肪经油红O染色检测，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 鸡前脂肪细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 脂肪组织 | 产品货号 | YS-01X7022 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 成纤维细胞样 传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠垂草扁桃酸(VMA)试剂盒 ，英文名： VMA ELISA Kit Mouse 6 keto prostaglandin (6-K-PG) ELISA Kit 小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)试剂盒 ELISA 小鼠环0酸鸟苷(mouse cGMP) 进口分装 CLIAKitforLF/LTFAb-Ig(HumanLactoferrinaibodyIgG)ELISAkit人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白抗体IgG 通用型HRP-AEC底物显色试剂盒10次 ELISAKitCollagenaseI胶原酶I 土壤碱性蛋白酶 可见分光光度法 50管/24样 FDA水解酶试剂盒 可见分光光度法 50管/24样 土壤酸性蛋白酶试剂盒 可见分光光度法 50管/24样 土壤漆酶测试盒 可见分光光度法 50管/48样 Intersectin 2抗体 小鼠17-酮类固醇(17-KS)ELISA 试剂盒 96T/48T Human gasin (Gasin) ELISA Kit 人胃泌素(Gasin)试剂盒 Humanandrogeeceptor,ARELISAKit 人雄激素受体(AR)试剂盒 96T/48T 进口分装 Humancoicoopin-releasingfactor,CRF人促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)试剂盒规格：96T/48T 组织CK2α激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次 HumanproteinkinaseC，PKCELISAKit人蛋白激酶C(PKC)试剂盒规格：96T/48T 高迁移率族蛋白2重组兔单克隆抗体 PVR重组小鼠 CD155 / PVR 蛋白 (His & Fc 标签) Protein CK7(Cytokeratin 7 0.5mgCK7(Cytokeratin 7)human 细胞角蛋白7抗原 TSC22D1重组人 TSC22D1 蛋白 Protein IFNA7 Protein Human 重组人 Interferon alpha 7 / IFNA7 蛋白 (Fc 标签) SCARB1 Protein Mouse 重组小鼠 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 蛋白 鸡前脂肪细胞CK7(Cytokeratin 7 0.5mgCK7(Cytokeratin 7)human 细胞角蛋白7抗原 IFNA7 Protein Human 重组人 Interferon alpha 7 / IFNA7 蛋白 (Fc 标签) PVR重组小鼠 CD155 / PVR 蛋白 (His & Fc 标签) Protein SCARB1 Protein Mouse 重组小鼠 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 蛋白 TSC22D1重组人 TSC22D1 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取
|
