细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
猪内皮分离自组织；心脏是脊椎动物身体中重要的一个器官，主要功能是为血液流动提供压力，把血液运行至身体各个部分。心脏由心肌构成，左心房、左心室、右心房、右心室四个腔组成。左右心房之间和左右心室之间均由间隔隔开，故互不相通，心房与心室之间有瓣膜（房室瓣），这些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心脏的作用是推动血液流动，向器官、组织提供充足的血流量，以供应氧和各种营养物质，并带走代谢的终产物（如二氧化碳、无机盐、尿素和尿酸等），使细胞维持正常的代谢和功能。在心脏停止的血液循环活动中扮演的角色即普通又关键：瓣膜相当于门卫，阻止血液回流于刚刚离开的心室。在心房与心室之间，在心室与离开心室的血管之间，都有瓣膜。血液流过后，瓣膜就会合上常见的瓣膜问题是二尖瓣脱垂，“二尖瓣"这个词源自“主教冠"，它是主教戴的帽子，有两个尖。位于左心房和左心室之间的瓣膜不能正常闭合。 方法简介：
公司实验室分离的猪内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的猪内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 猪心脏瓣膜内皮细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 心脏组织 | 产品货号 | YS-01X7019 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 内皮细胞样 |
培养信息：
包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%） 培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 内皮细胞样 传代特性 可传2-3代 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠β淀粉样蛋白(Aβ)试剂盒 ，英文名： Aβ ELISA Kit Mouse adrenocoicoopic hormone (ACTH) ELISA Kit 小鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)试剂盒 ELISA 小鼠催产素(mouse Oxytocin) 进口分装 CLIAKitforIL-1Beta(MouseIerleukin1Beta)ELISAKit小鼠白介素1β 通用型牛Q热病(QFever)试剂盒20次 ELISAKitANG-Ⅱ大鼠血管紧张素Ⅱ 兔S100A6蛋白 英文名称： Rabbit S100 Calcium-binding Protein A6 英文缩写： S100A6 兔可溶性细胞间黏附分子1 英文名称： Rabbit soluble Iercellular Adhesion Molecular 1 英文缩写： sICAM-1 兔基质细胞衍化生长因子1a 英文名称： Rabbit Somal cell Derived Factor 1a 英文缩写： SDF1a 兔超氧化物歧化酶 英文名称： Rabbit Superoxide Dismase 英文缩写： SOD TOMM22蛋白抗体 小鼠Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)ELISA 试剂盒 96T/48T Rat plasmin aiplasmin complex (PAP) ELISA Kit 大鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)试剂盒 HumanLongactingthyroidstimulator,LATSELISAKit 人长效甲状腺刺激素(LATS)试剂盒 96T/48T 进口分装 HumanCoronavirusesIgG试剂盒人(CoronavirusesIgG)试剂盒规格：96T/48T 组织CDK7/CYCLINH激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次 HumanProteinSELISAKit人蛋白S(ProteinS)试剂盒规格：96T/48T 酰基脱氢酶中链重组兔单抗 PPBP重组食蟹猴 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (Fc 标签) Protein MIP3 Alpha/CCL20(Macrophage inflammatory ptotein 3 alpha 0.5mgMIP3 Alpha/CCL20(Macrophage inflammatory ptotein 3 alpha) 巨噬细胞性蛋白3α抗原 KLK4重组人 KLK-4 / Kallikrein-4 蛋白 Protein ICOSLG Protein Human 重组人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (Fc 标签) TNFSF13 Protein Mouse 重组小鼠 TNFSF13 蛋白 (Fc 标签) 猪心脏瓣膜内皮细胞MIP3 Alpha/CCL20(Macrophage inflammatory ptotein 3 alpha 0.5mgMIP3 Alpha/CCL20(Macrophage inflammatory ptotein 3 alpha) 巨噬细胞性蛋白3α抗原 ICOSLG Protein Human 重组人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (Fc 标签) PPBP重组食蟹猴 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (Fc 标签) Protein TNFSF13 Protein Mouse 重组小鼠 TNFSF13 蛋白 (Fc 标签) KLK4重组人 KLK-4 / Kallikrein-4 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取
|
