细胞简介：

猪成骨分离自颅骨组织；颅骨位于脊柱上方，由23块形状和大小不同的扁骨和不规则骨组成。除下颌骨及舌骨外，其余各骨彼此借缝或软骨牢固连结，起着保护和支持脑、感觉器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。颅分脑颅和面颅两部分。脑颅位于颅的后上部，内有颅腔，容纳脑，共8块。面颅为颅的前下部分，包含眶、鼻腔、口腔等结构，构成面部的支架，共15块。成骨细胞是骨形成的主要功能细胞，负责骨基质的合成、分泌和矿化。骨不断地进行着重建，骨重建过程包括破骨细胞贴附在旧骨区域，分泌酸性物质溶解矿物质，分泌蛋白酶消化骨基质，形成骨吸收陷窝；其后，成骨细胞移行至被吸收部位，分泌骨基质，骨基质矿化而形成新骨；破骨与成骨过程的平衡是维持正常骨量的关键。成骨细胞培养不仅有助于了解骨形成机制、骨骼系统疾病的分子和细胞学基础，也是药物筛选、生物材料开发和生物工程研究的重要手段。

方法简介：

公司实验室分离的猪成骨采用先用短时间消化、后用胶原酶反复消化制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的猪成骨经ALP染色检测，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的产品：

大鼠原激活蛋白激酶14(MAPK14)试剂盒 ，英文名： MAPK14 ELISA Kit

Mouse advanced glycation end products (AGEs) ELISA Kit 小鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)试剂盒

Ratadiponectin,ADPELISAKit 大鼠脂联素(ADP)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHHCII(umanheparincofactorII)ELISAKit人肝素辅因子Ⅱ

细胞S6KINASE激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitCⅠCP大鼠Ⅰ型前胶原C末端肽

兔白介素-18(rabbit IL-18)   作用：   ELISA  

兔免疫球蛋白G(rabbit IgG)   作用：   ELISA  

兔免疫球蛋白M(rabbit IgM)   作用：   ELISA  

兔免疫球蛋白E(rabbit IgE)   作用：   ELISA

磷酸化Ets转录因子家族ets1抗体

小鼠Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat cyclin D3 (Cyclin-D3) ELISA Kit 大鼠细胞周期素D3(Cyclin-D3)试剂盒

HumanNandrolonePhenylpropionate,NPELISAKit 人苯诺龙/苯去(NP)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanconcanavalinA,ConA试剂盒人刀A(ConA)试剂盒规格：96T/48T

组织CDK5/P25激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

HumanProteinase3Aibody,PR3AbELISAKit人蛋白酶3抗体(PR3Ab)试剂盒规格：96T/48T

信号通路Wnt3a抗体

GAG-P24重组人类免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group M, subtype C, strain 92BR025) Protein

Thioster-containing protein 1 硫酯包含蛋白-1(抗原 0.5mgThioster-containing protein 1 硫酯包含蛋白-1(抗原)

IL7R重组人 IL7RA / CD127 蛋白 Protein

ICAM5 Protein Human 重组人 ICAM 5 / Intercellular adhesion molecule 5 蛋白 (Fc 标签)

HRG Protein Human 重组人 HPRG / HRG 蛋白

猪成骨细胞Thioster-containing protein 1 硫酯包含蛋白-1(抗原 0.5mgThioster-containing protein 1 硫酯包含蛋白-1(抗原)

ICAM5 Protein Human 重组人 ICAM 5 / Intercellular adhesion molecule 5 蛋白 (Fc 标签)

GAG-P24重组人类免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group M, subtype C, strain 92BR025) Protein

HRG Protein Human 重组人 HPRG / HRG 蛋白

IL7R重组人 IL7RA / CD127 蛋白 Protein