细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
猪主动脉平滑肌分离自主动脉组织；主动脉是体循环的动脉主干。其运行路径为：升主动脉起于左心室，至右侧第2胸肋关节高度移行为主动脉弓，弓行向左后至第4胸椎体下缘移行为降主动脉；在第12胸椎体高度穿膈的主动脉裂孔移行为腹主动脉，以上为胸主动脉，至第4腰椎体下缘分为左、右髂总动脉；髂总动脉在骶髂关节高度分为髂内、外动脉。主动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。主动脉平滑肌细胞在心血管疾病发生、发展中具有重要作用，以主动脉平滑肌细胞为实验研究对象，探讨心血管疾病相关发病机制是目前研究的热点；体外培养的主动脉平滑肌细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。 方法简介：
实验室分离的猪主动脉平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 质量检测：
实验室分离的猪主动脉平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 猪主动脉平滑肌细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 主动脉 | 产品货号 | YS-01X8560 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息：
换液频率：每2-3天换液一次 生长特性：贴壁 细胞形态：成纤维细胞样 传代特性：可传3-5代左右；3代以内状态佳 消化液：0.25% 培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 猪主动脉平滑肌体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)试剂盒 ，英文名： FⅧAg ELISA Kit Porcine hyaluronic acid (HA) ELISA Kit 猪透明质酸(HA)试剂盒 马铃薯特定基因序列(PATA)核酸试剂盒 48T CLIAKitforLSP(Humanliverspecificlipoprotein)ELISAKit人抗肝特异性脂蛋白抗体 通用AP酶联检测封闭溶液100毫升 ELISAKitIgY鸡卵黄免疫球蛋白 小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)试剂盒 小鼠转化生长因子α(TGF-α)试剂盒 小鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)试剂盒 小鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ试剂盒 SHISA蛋白家族9抗体 14-3-3 protein ζ/δ抗体 KIT重组小鼠 c-kit / CD117 蛋白 Protein Amylin 糖尿病相关肽(胰岛淀粉样肽 0.5mgAmylin 糖尿病相关肽(胰岛淀粉样肽) IL36G重组人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169) Protein CD22 Protein Human 重组人 Siglec-2 / CD22 蛋白 IL1RN Protein Rat 重组大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 标签) Amylin 糖尿病相关肽(胰岛淀粉样肽 0.5mgAmylin 糖尿病相关肽(胰岛淀粉样肽) CD22 Protein Human 重组人 Siglec-2 / CD22 蛋白 KIT重组小鼠 c-kit / CD117 蛋白 Protein IL1RN Protein Rat 重组大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 标签) IL36G重组人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169) Protein 猪主动脉平滑肌细胞小鼠氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)pcr检测试剂盒 Eighth factors in rats with associated aigen (F VIII Ag) ELISA Kit 大鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)试剂盒 Humanargininevasopressin,AVPELISAKit 人精加压素(AVP)pcr检测试剂盒分装 CLIAKitfor1,5-AG(Human1,5-anhydroglucitol)ELISAKit人1,5-脱水葡萄糖醇/1,5-脱水山梨 饮料三氯蔗糖(sucralose)含量高效液相色谱法定量试剂盒20次 MouseLactateDehydrogenase,LDHELISAKit小鼠乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒规格：96T/48T 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取
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