
小鼠牙胚细胞
| 商品属性: 组织来源 | 牙胚 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 产品货号 | YS-01X8540 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 梭形、多角形 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
| 细胞介绍: 小鼠牙胚分离自牙胚组织;牙胚是牙齿开始发育阶段的形态,是由牙板向深层的结缔组织内伸延,在其末端细胞增生,进一步发育成牙胚。牙胚有三部分组成:①成釉器(enamel organ),起源于口腔外胚层,形成釉质;②牙乳头(dental papilla),起源于外胚层间充质,形成牙髓和牙本质;③牙囊(dental sac),起源于外胚层间充质,形成牙骨质、牙周膜和固有牙槽骨。牙胚的发生是口腔上皮和外胚间充质相互作用的结果。在胚胎的第5周,覆盖在原口腔的上皮由两层细胞组成,外层是扁平上皮细胞,内层为矮柱状的基底细胞。在未来的牙槽突区,深层的外胚层间充组织诱导上皮增生,开始仅在上下颌弓的特定点上,上皮局部增生,很快增厚的上皮相互连接,依照颌骨的外形形成一马蹄形上皮带,称为原发性上皮带。在胚胎的第7周,这一上皮带继续向深层生长,并分裂为两个:向颊(唇)方向生长的上皮板称前庭板,位于舌(腭)侧的上皮板称为牙板(dental lamina)。在胚胎的第8-10周,前庭板继续向深层生长,与发育的牙槽嵴分开,前庭板表面上皮变性,形成口腔前庭沟。 | 方法简介: 实验室分离的小鼠牙胚采用胶原酶消化法制备而来制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 | 质量检测: 实验室分离的小鼠牙胚经检测,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 | 培养信息: 培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率:每2-3天换液一次 生长特性:贴壁 细胞形态:梭形、多角形 传代特性:可传2-3代左右 消化液:0.25% 培养条件:气相:空气,95%;CO2,5% 小鼠牙胚体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。 | 细胞培养操作:
1)复苏细胞:将含有细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。 2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。 2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。 3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类; 1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 | 注意事项:
1. 收到非红系有核细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件*。若由于培养条件不*而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。 3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。 4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待ATCC CRL-1711(Sf9)细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。 5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。 6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。 7.该细胞仅供科研使用。 | 公司正在出售的产品
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