细胞简介: 
小鼠外周血DC分离自外周血,由外周血单核细胞诱导而成的;外周血是除骨髓之外的血液,临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中,再在从血液中提取分离得到造血干细胞,我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞,在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。树突状细胞分为成熟树突状细胞和未成熟树突状细胞,典型的未成熟树突状细胞呈半贴壁生长,在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串样集落,细胞大而形态不规则,表面皱褶多,亦可见少量短刺状突,胞内细胞器丰富并可见吞噬泡,具有较强的迁移能力,伴随有部分未诱导成的单核细胞,贴壁形态多样。而成熟的树突状细胞由未成熟DC进一步经TNFα、LPS等诱导而成,多数呈悬浮生长, 细胞呈圆形,细胞体积进一步增大,表面大量粗细不等的树枝样突起(高倍镜或者电镜下可观察到 ),伴随少量贴壁未成熟细胞或者单核细胞。未成熟DC细胞长时间培养也可能导致自发分化成熟。DC细胞尚无特异性细胞表面分子标志,主要通过形态学、组合性细胞表面标志、在混合淋巴细胞反应中能激活初始T细胞等特征进行鉴定。其中成熟树突状细胞表面高表达主要组织相容性复合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,进而激活T淋巴细胞,诱导免疫应答,处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节;未成熟树突状细胞具有很强的抗原摄取加工能力,但由于缺乏多种共刺激分子不能使初始T细胞活化、增殖产生免疫应答,不能激活T细胞的第二信号,可导致T细胞无能,从而诱导免疫低反应或抗原免疫特异性耐受。未成熟树突状细胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ类分子等共刺激分子表达较低,一般在30%以下。 方法简介:

实验室分离的小鼠外周血未成熟DC采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞、培养过程添加细胞因子诱导而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 质量检测:

实验室分离的小鼠外周血树突状(未成熟DC细胞)经CD86免疫荧光鉴定、细 胞 形态等综合鉴定,纯度可达80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 小鼠外周血树突状细胞(未成熟DC细胞) | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 外周血 | 产品货号 | YS-01X8535 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 圆形、梭形、多角形,形态多样 |
培养信息:

培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率:每2-3天换液一次 生长特性:半贴壁半悬浮 细胞形态:圆形、梭形、多角形,形态多样 传代特性:属于高度分化细胞;属于不增殖细胞群 消化液:0.25% 培养条件:气相:空气,95%;CO2,5% 小鼠外周血树突状(未成熟DC细胞)体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。 
细胞传代步骤:
 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。 3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。 4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞复苏步骤:
 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 细胞冻存步骤:
 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。 3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 公司正在出售的产品:
 大鼠蛋白激酶Cζ(PKCζ)试剂盒 ,英文名: PKCζ ELISA Kit N cadherin / neural cadherin (N-Cad) ELISA Kit 人N钙黏蛋白/神经钙黏蛋白(N-Cad)试剂盒 RatIerleukin17,IL-17ELISAKIT 大鼠白介素17(IL-17)pcr检测试剂盒分装 CLIAKitforCXCR3(HumanCXC-chemokinereceptor3)ELISAKit人CXC趋化因子受体3 细胞色素P450亚酶CYP2E1(NPH)活性比色法定量试剂盒20次 RatFattyacyl-CoAsyhetase,ACSELISAKit大鼠脂酰合成酶(ACS)试剂盒规格:96T/48T 小鼠髓0脂碱性蛋白(MBP)ELISAKit ELISA 小鼠转化生长因子α(TGF-α)ELISAKit ELISA 小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISAKit ELISA 小鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)ELISAKit ELISA 白细胞抗原B相关转录蛋白5抗体 AF750标记的多巴胺转运蛋白DAT抗体 NCSTN重组小鼠 Nicastrin / NCSTN 蛋白 Protein 蛋白激酶Cη(PKCη)重组蛋白 Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh) VAMP3重组人 VAMP3 / Cellubrevin 蛋白 Protein CHI3L2 Protein Human 重组人 CHI3L2 / YKL-39 蛋白 IL10RA Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IL10RA 蛋白 (Fc 标签) A/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human 0.5mgA/H1N1-M2 Human(Avian influenza Matrix Protein-2 Human) A型人流感病毒H1N1-M2蛋白多肽 CHI3L2 Protein Human 重组人 CHI3L2 / YKL-39 蛋白 FGF21重组小鼠 FGF21 / Fibroblast Growth Factor 21 蛋白 Protein FGFR4 Protein Rat 重组大鼠 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 CANT1重组人 CANT1 蛋白 (Fc 标签) Protein 小鼠外周血树突状细胞(未成熟DC细胞)小鼠糖皮质激素受体α(GR-α)ELISA pcr检测试剂盒 Rat cyclosporine A (CsA) ELISA Kit 大鼠A(CsA)试剂盒 Humanoctameranscriptionfactor2A,OTF2AELISAKit 人八聚体转录因子(OTF2A)pcr检测试剂盒分装 Chickenα-Glucosidase,a-Glu试剂盒鸡α葡萄糖苷酶(a-Glu)试剂盒规格:96T/48T 载玻片细胞αSMA蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次 MouseEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit小鼠(EPI)试剂盒规格:96T/48T
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