细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
小鼠口腔黏膜成纤维分离自口腔黏膜组织；口腔(oral cavity)是消化道的起始部分。前借口裂与外界相通，后经咽峡与咽相续。口腔内有牙、舌等器官。口腔的前壁为唇、侧壁为颊、顶为腭、口腔底为黏膜和肌等结构。口腔借上、下牙弓分为前外侧部的口腔前庭(oral vestibule)和后内侧部的固有口腔(oral cavity proper)；当上、下颌牙咬合时，口腔前庭与固有口腔之间可借第三磨牙后方的间隙相通。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的表皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。 方法简介：
实验室分离的小鼠口腔黏膜成纤维采用 - 胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 质量检测：
实验室分离的小鼠口腔黏膜成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 小鼠口腔黏膜成纤维细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 口腔黏膜 | 产品货号 | YS-01X8508 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息：
培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率：每2-3天换液一次 生长特性：贴壁 细胞形态：成纤维细胞样 传代特性：可传1-2代 消化液：0.25% 培养条件：气相：空气，95%；CO2，5% 小鼠口腔黏膜成纤维体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
小鼠β葡萄糖酸苷酶(βGD)ELISA 试剂盒 Human vitamin A (VA) ELISA Kit 人A(VA)试剂盒 HumanCathepsinK,cath-KELISAKit 人组织蛋白酶K(cath-K)pcr检测试剂盒分装 HumancecropinB,CecB试剂盒人杀菌肽B(CecB)试剂盒规格：96T/48T 转基因玉米GA21品系试剂盒20次 HumanSerumamyloidP，SAPELISAKit人血清淀粉样蛋白P(SAP)试剂盒规格：96T/48T 人足盂蛋白(PCX)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human PCX (Podocalyxin) ELISA Kit 人组织多肽抗原(TPA)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human TPA (Tissue Polypeptide Aigen) ELISA Kit 人组织多肽特异性抗原(TPS)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human TPS (Tissue Polypeptide Specific Aigen) ELISA Kit 人清道夫受体B类成员1(SCARB1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Human SCARB1 (Scavenger receptor class B member 1) ELISA kit 高迁移率族蛋白2抗体 DIRAS2蛋白抗体 CXCL2重组小鼠 CXCL2 / GRO2 / MIP-2 蛋白 (His & SUMO 标签) Protein ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.2mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(7-23) 促肾上腺皮质激素(7-23)(抗原) ADAMTSL1重组人 ADAMTSL1 / PUNCTIN 蛋白 Protein IL21 Protein Human 重组人 Interleukin-21 / IL-21 蛋白 EDA2R Protein Rat 重组大鼠 XEDAR / EDA2R 蛋白 (Fc 标签) ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.2mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(7-23) 促肾上腺皮质激素(7-23)(抗原) IL21 Protein Human 重组人 Interleukin-21 / IL-21 蛋白 CXCL2重组小鼠 CXCL2 / GRO2 / MIP-2 蛋白 (His & SUMO 标签) Protein EDA2R Protein Rat 重组大鼠 XEDAR / EDA2R 蛋白 (Fc 标签) ADAMTSL1重组人 ADAMTSL1 / PUNCTIN 蛋白 Protein 小鼠口腔黏膜成纤维细胞豚鼠坏死因子α(TNF-α)试剂盒 ，英文名： TNF-α ELISA Kit Human protein kinase C (PKC) ELISA Kit 人蛋白激酶C(PKC)试剂盒 Monkeyα1-microglobulin,α1-MGELISAKitα1微球蛋白(α1-MG)pcr检测试剂盒分装 CLIAKitforBMP-6ELISAKit大鼠骨形成蛋白6 细菌镁ATP酶(Mg++-ATPase)活性比色法定量试剂盒20次 Rabbitmyelinbasicprotein,MBPELISAKit兔子髓0脂碱性蛋白(MBP)试剂盒规格：96T/48T 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取
|
