小鼠骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)

| 商品属性：

| 细胞介绍：

小鼠骨髓树突状分离自骨髓；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此，骨髓不但是造血器官，它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔，随着年龄增大，脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓DC细胞是由骨髓单核细胞诱导而成的；树突状细胞分为成熟树突状细胞和未成熟树突状细胞，典型的未成熟树突状细胞呈半贴壁生长，在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串样集落，细胞大而形态不规则，表面皱褶多，亦可见少量短刺状突，胞内细胞器丰富并可见吞噬泡，具有较强的迁移能力，伴随有部分未诱导成的单核细胞，贴壁形态多样。而成熟的树突状细胞由未成熟DC进一步经TNFα、LPS等诱导而成，多数呈悬浮生长， 细胞呈圆形，细胞体积进一步增大，表面大量粗细不等的树枝样突起(高倍镜或者电镜下可观察到 )，伴随少量贴壁未成熟细胞或者单核细胞。未成熟DC细胞长时间培养也可能导致自发分化成熟。DC细胞尚无特异性细胞表面分子标志，主要通过形态学、组合性细胞表面标志、在混合淋巴细胞反应中能激活初始T细胞等特征进行鉴定。其中成熟树突状细胞表面高表达主要组织相容性复合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子，进而激活T淋巴细胞，诱导免疫应答，处于启动、调控、并维持免疫应答的中心环节；未成熟树突状细胞具有很强的抗原摄取加工能力，但由于缺乏多种共刺激分子不能使初始T细胞活化、增殖产生免疫应答，不能激活T细胞的第二信号，可导致T细胞无能，从而诱导免疫低反应或抗原免疫特异性耐受。未成熟树突状细胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ类分子等共刺激分子表达较低，一般在30%以下。

| 方法简介：

实验室分离的小鼠骨髓未成熟DC采用密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞、培养过程添加细胞因子诱导而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

| 质量检测：

实验室分离的小鼠骨髓树突状(未成熟DC细胞)经CD86免疫荧光鉴定、细 胞 形态等综合鉴定，纯度可达80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

| 培养信息：

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：半贴壁半悬浮

细胞形态：圆形、梭形、多角形，形态多样

传代特性：属于高度分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

小鼠骨髓树突状(未成熟DC细胞)体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

| 细胞培养操作：

1）复苏细胞：将含有细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
| 公司正在出售的产品

小鼠α干扰素(IFN-α)ELISA 试剂盒

Rat aquaporin 1 (AQP-1) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)试剂盒

HumanNeonatalThyroidStimulatingHormone,N-TSHELISAKit 人新生儿促甲状腺素(N-TSH)试剂盒分装

HumanChorionicGonadoophinβ,β-CG试剂盒人绒毛膜β(β-CG)试剂盒

总微型RNA(miRNA)超滤法分离试剂盒10次

HumanSalusinαELISAKit人Salusin-α试剂盒

脂联素   英文名称：   Adiponectin   英文缩写：   APN/ADP   规格：  

脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白   英文名称：   Adipocyte Fatty Acid Binding Protein   英文缩写：   a FABP   规格：  

载脂蛋白   英文名称：   Apolipoprotein   英文缩写：   AI   规格：  

抗Livin 抗体   英文名称：   Ailivin aibody   英文缩写：   ALA   规格：

核帽结合蛋白2样蛋白抗体

FAM50A蛋白抗体

CDH5重组小鼠 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 蛋白 (His 标签) Protein

CD138/Syndecan-1 多配体蛋白聚糖1抗原 0.5mgCD138/Syndecan-1 多配体蛋白聚糖1抗原

STK24重组人 STK24 / MST3 蛋白 (His 标签) Protein

ACYP1 Protein Human 重组人 ACYP1 / Acylphosphatase-1 蛋白 (GST 标签)

EPHA3 Protein Rat 重组大鼠 EphA3 蛋白

CD138/Syndecan-1 多配体蛋白聚糖1抗原 0.5mgCD138/Syndecan-1 多配体蛋白聚糖1抗原

ACYP1 Protein Human 重组人 ACYP1 / Acylphosphatase-1 蛋白 (GST 标签)

CDH5重组小鼠 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 蛋白 (His 标签) Protein

EPHA3 Protein Rat 重组大鼠 EphA3 蛋白

STK24重组人 STK24 / MST3 蛋白 (His 标签) Protein

小鼠骨髓树突状细胞(未成熟DC细胞)植物C(VC)ELISA 试剂盒

Human ai Toxoplasma IgG aibody (ai-tox IgG) ELISA Kit 人抗弓形体IgG抗体(ai-tox IgG)试剂盒

PorcineHyaluronicacid,HAELISAKit 猪透明质酸(HA)试剂盒分装

CLIAKitforAFPELISAKit大鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白

血液血管紧张素Ⅰ转化酶(ACE)总活性荧光定量试剂盒20次

MouseThioredoxin,xELISAKit小鼠硫氧化还原蛋白(x)试剂盒

| 注意事项：

1. 收到非红系有核细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件*。若由于培养条件不*而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。

4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待ATCC CRL-1711(Sf9)细 胞汇 合度  80%左右时正常传代。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和 技术 部 沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联 系，告知细胞的具体情况，以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7.该细胞仅供科研使用