细胞传代步骤：
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞简介：
小鼠主动脉外膜成纤维分离自主动脉血管外膜组织；血管外膜是由疏松结缔组织组成，其中含螺旋状或纵向分布的弹性纤维和胶原纤维。血管壁的结缔组织细胞以成纤维细胞为主，当血管受损伤时，成纤维细胞具有修复外膜的能力。有的动脉中膜和外膜的交界处，有密集的弹性纤维组成的外弹性膜。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的血管外膜成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。血管外膜成纤维细胞是血管外膜的主要组成细胞之一，其主要生理功能合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。 方法简介：
公司实验室分离的小鼠主动脉外膜成纤维采用-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。 质量检测：
公司实验室分离的小鼠主动脉外膜成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 产品名称 | 小鼠主动脉外膜成纤维细胞 | 产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 组织来源 | 主动脉组织 | 产品货号 | YS-01X7642 | 生长特性 | 贴壁 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 成纤维细胞样 传代特性 可传1-2代左右 消化液 0.25% 培养条件 气相：空气，95%；CO2，5% 
细胞复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 公司正在出售的产品：
大鼠单酰(malonyl CoA)试剂盒 ，英文名： malonyl CoA ELISA Kit Mouse alpha galactosyl aibody (Gal) ELISA Kit 小鼠α半乳糖基抗体(Gal)试剂盒 ELISA 小鼠(mouse EPI) 进口分装 CLIAKitforKLK1(HumanKallikrein1)ELISAKit人1 通用型大肠杆菌(Escherichiacoli)试剂盒20次 ELISAKitTFR/CD71大鼠转铁蛋白受体 兔干细胞因子(rabbit SCF) 作用： ELISA 兔转化生长因子-a(rabbit TGF-a) 作用： ELISA 兔转化生长因子-β1(rabbit TGF-b1) 作用： ELISA 兔转化生长因子-b2(rabbit TGF-b2) 作用： ELISA CD339抗体 小鼠B因子(BF)ELISA 试剂盒 96T/48T Rat peosidine ELISA Kit (Peosidine) 大鼠戊糖素(Peosidine)试剂盒 HumanFollistatin,FSELISAKit 人卵泡抑素(FS)试剂盒 96T/48T 进口分装 HumanCompleme3,C3试剂盒人补体蛋白3(C3)试剂盒规格：96T/48T 组织a-(a-AMYLASE)活性比色法定量试剂盒20次 HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinC,SP-CELISAKit人肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)试剂盒规格：96T/48T 大脑蛋白2抗体 干扰素α4(IFNα4)重组蛋白 Recombinant Interferon Alpha 4 (IFNa4) GPD1重组人 GPD1 / Glycerolphosphate Dehydrogenase 1 蛋白 Protein HSPD1 Protein Human 重组人 HSPD1 / HSP60 蛋白 (His & GST 标签) FCGR3 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CD16 / FCGR3 蛋白 (His & AVI 标签), Biotinylated 小鼠主动脉外膜成纤维细胞Dermokine蛋白(DMKN)重组蛋白 Recombinant Dermokine (DMKN) HSPD1 Protein Human 重组人 HSPD1 / HSP60 蛋白 (His & GST 标签) HDAC8重组小鼠 HDAC8 / HDACL1 蛋白 Protein CD86 Protein Rat 重组大鼠 CD86 / B7-2 蛋白 IL27重组人 IL27 / Interleukin-27 蛋白 Protein 细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取
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