小鼠心脏干细胞

| 商品属性：

| 细胞介绍：

小鼠心脏干分离自心脏组织；心脏是脊椎动物身体中重要的一个器官，主要功能是为血液流动提供压力，把血液运行至身体各个部分。心脏由心肌构成，左心房、左心室、右心房、右心室四个腔组成。左右心房之间和左右心室之间均由间隔隔开，故互不相通，心房与心室之间有瓣膜（房室瓣），这些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心脏的作用是推动血液流动，向器官、组织提供充足的血流量，以供应氧和各种营养物质，并带走代谢的终产物（如二氧化碳、无机盐、尿素和尿酸等），使细胞维持正常的代谢和功能。研究发现，心脏干细胞是一种多潜能细胞，具有再生和克隆能力，并可分化为心肌细胞、平滑肌细胞和血管内皮细胞。体内研究显示，从心脏中分离出的心脏干细胞，经体外简单培养、增殖和标记后，移植到心肌梗死边缘区域，心梗血流动力学和心室壁厚度较对照组明显改善，心肌梗死边缘区域发现有标记的心肌细胞、平滑肌细胞和内皮细胞。尽管其新生心肌细胞较小，但表达一些特殊肌蛋白如心脏肌球蛋白重链、α-肌动蛋白、α-辅肌动蛋白、连接蛋白等，证实了心脏干细胞对心肌梗死的修复作用。干细胞移植治疗是目前心肌梗死和缺血性心脏病细胞重建的主要方法，成体干细胞中的c-kit阳性心脏干细胞因其来源于心脏，有定向心脏细胞系分化的趋势，体内外可以分化成心肌细胞、血管内皮细胞和平滑肌细胞，同时自体移植不存在免疫排斥反应及伦理问题已经成为目前研究的热点。短期内获得治疗量的自体心脏干细胞是这一治疗应用于临床的关键所在。因此，研究一种新的分离培养方法可在短时期内获得大量纯度较高的自体c-kit阳性心脏干细胞成为目前干细胞领域研究的热点问题之一。

| 方法简介：

公司实验室分离的小鼠心脏干采用机械剪碎组织、胶原酶分次消化法结合差速贴壁、心脏干细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

| 质量检测：

公司实验室分离的小鼠心脏干经c-kit免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

| 培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 长梭形

传代特性 可传2-3代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

| 细胞培养操作：

1）复苏细胞：将含有细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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大鼠克拉拉细胞蛋白16(CC16)试剂盒 ，英文名： CC16 ELISA Kit

Mouse apolipoprotein A1 (apo-A1) ELISA Kit 小鼠载脂蛋白A1(apo-A1)试剂盒

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磷酸化内收蛋白抗体

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MMP-20(matrix metalloproteinase 20 0.5mgMMP-20(matrix metalloproteinase 20) 基质金属蛋白酶20抗原

MAP2K2重组人 MEK2 / MAP2K2 / MKK2 蛋白 (GST 标签) Protein

GUCA1A Protein Human 重组人 GCAP1 / GUCA1A 蛋白

CSF1R Protein Mouse 重组小鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His & Fc 标签)

小鼠心脏干细胞MMP-20(matrix metalloproteinase 20 0.5mgMMP-20(matrix metalloproteinase 20) 基质金属蛋白酶20抗原

GUCA1A Protein Human 重组人 GCAP1 / GUCA1A 蛋白

EFNA5重组食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 标签) Protein

CSF1R Protein Mouse 重组小鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (His & Fc 标签)

MAP2K2重组人 MEK2 / MAP2K2 / MKK2 蛋白 (GST 标签) Protein

| 注意事项：

1. 收到非红系有核细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件*。若由于培养条件不*而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。

3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。

4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待ATCC CRL-1711(Sf9)细 胞汇 合度  80%左右时正常传代。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。

6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和 技术 部 沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联 系，告知细胞的具体情况，以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7.该细胞仅供科研使用