细胞简介：

小鼠肾足突分离自肾组织；肾小球是肾元中的用于将血液过滤生成原尿的一团毛细血丛，被鲍氏囊所包裹，是尿液形成的重要构造。血液经由入球小动脉进入肾小球。肾小球内的微血管不像其他微血管，汇流入静脉，而是流入出球小动脉。在肾小球内，微血管受到高压，而加速了超滤作用（hyperfiltration）的进行。微血管中的血液经由超滤作用之后，形成滤液，渗入鲍氏囊内。肾小球与鲍氏囊合称为肾小体，肾小球的过滤速率便称为肾小球过滤率。足细胞（podocyte）即肾小囊脏层上皮细胞，它附着于肾小球基底膜（GBM）的外侧，连同GBM和毛细血管内皮一起构成了肾小球血液滤过屏障。足细胞特殊的解剖位置，使得其体内研究较为困难；又由于正常成年机体的肾脏足细胞是一种终末分化细胞，体外培养的原代细胞不能增殖。足细胞呈星型多突状，胞体较大，由胞体伸出许多突起，又称足突（FP），呈指状交叉复盖于GBM外表面，并通过黏附分子和蛋白多糖分子与GBM相连。足细胞在正常情况下可以分泌GBM的主要组成成分，IV型胶原和纤维连接蛋白（FN）；在促肾纤维化引资等刺激下还能分泌具有降解GBM作用的基质金属蛋白酶（MMPs）和组织蛋白酶，从而在GBM的代谢平衡中发挥重要作用。足细胞之间邻近的足突相互交替，形成了许多30-40nm的裂孔，孔上覆盖一层厚4-6nm的裂孔隔膜，即肾小球足突间裂孔隔膜。后者是血浆蛋白通过脉管系统的后屏障，对于维持肾小球滤过屏障结构与功能完整性发挥关键作用。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠肾足突采用机械研磨过不同孔径不锈钢网筛结合胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的小鼠肾足突经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞传代步骤：

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞复苏步骤:

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

细胞冻存步骤:

待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 
1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 
2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的产品：

大鼠糖原合酶激酶3β(GSK3β)试剂盒 ，英文名： GSK3β ELISA Kit

Mouse carbonic anhydrase 2 (CA-2) ELISA Kit 小鼠酶2(CA-2)试剂盒

RatFreeTestoterone,F-TESTOELISAKit 大鼠游离睾酮(F-TESTO)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHMGCS1(Human3-hydroxy-3-methylglaryl-CoenzymeAsyhase1)ELISAKit人3-羟基-3-甲基戊二酰合酶1

细胞PKCη激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitFlt3大鼠FMS样酪激酶3

兔子脑素/脑尿肽(BNP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子内皮抑素(ES)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子内皮素1(ET-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子免疫球蛋白G(IgG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

嗅觉受体5AS1抗体

小鼠白介素5(IL-5)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human dehydroepiandrosterone (DHEA) ELISA Kit 人脱氢表雄酮(DHEA)试剂盒

Humanspleeyrosinekinase,SykELISAKit 人脾脏酪激酶(Syk)试剂盒 96T/48T 进口分装

Humancalnexin,CNX试剂盒人钙联蛋白(CNX)试剂盒规格：96T/48T

重组逆转录病毒感染试剂盒20次

Humansolubleierleukin-2receptor，IL-2sRαELISAKit人白介素2可溶性受体α链(IL-2sRα/CD25)试剂盒规格：96T/48T

Notch1蛋白抗体

HA重组甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

PLAU/uPA (Plasminogen activator,urokinase 0.5mgPLAU/uPA (Plasminogen activator,urokinase) 型纤溶酶原激活因子(多肽)

CDK1重组人 CDC2 Kinase / CDK1 蛋白 (GST 标签) Protein

GFER Protein Human 重组人 GFER / ALR 蛋白

FGF1 Protein Human 重组人 aFGF / FGF1 蛋白

小鼠肾足突细胞TRAIL/Apo2L (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 0.5mgTRAIL/Apo2L (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand) 坏死因子相关凋亡诱导配体/凋亡素2配体抗原

GFER Protein Human 重组人 GFER / ALR 蛋白

GFP重组水母 GFP 蛋白 Protein

IL32 Protein Human 重组人 Interleukin-32 / IL-32 蛋白 (isoform alpha, His 标签)

AMICA1重组人 JAML / AMICA 蛋白 Protein